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微量样品外泌体纯化试剂盒(磁珠
企业认证
999999
Omiget
AE03-01
12个月
奥秘佳得
4℃
20T
特点与优势。1. 本试剂纯化效率高,外泌体回收率达到 95%以上。2. 本试剂盒纯化的外泌体纯度高,杂蛋白含量在 5%以内。3. 本试剂盒操作简单,能够快速(2 h)完成外泌体纯化。4. 本试剂盒操作温和,纯化时间短,纯化的外泌体完整性好。1. 本产品可用于血清、血浆或其他微量样品中外泌体的纯化。2. 样品准备。样品转入离心管,3000 g,4 ℃离心 5 min,弃沉淀,上清转移至新的离心管中,用 于外泌体纯化。3. 磁珠准备。取出试剂盒中的瓶装磁珠,震荡混匀(Vortex)30 sec,利用移液器吸取 0.1 ml 磁珠, 加入 1 ml 离心管中,3000 g,4 ℃离心 2 min,弃上清。4. 磁珠洗涤。加入 1 ml,4 ℃预冷的 PBS,震荡混匀(Vortex)30 sec,3000 g,4 ℃离心 5 min, 弃上清。5. 外泌体纯化体系。外泌体纯化体系为 1 ml,可以纯化 0.69 ml 的样品,各组份如下表。6. 外泌体纯化体系配制。根据外泌体纯化体系表,配制外泌体纯化体系,若样品体积不足 690 μl, 可以用 ddH2O 补齐体积。7. 孵育。外泌体纯化体系配制完成后,置于旋转混合器中,4 ℃旋转混合 60 min。8. 磁珠收集。孵育完毕将离心管转入离心机,3000 g,4 ℃离心 5 min,沉淀磁珠,弃上清;或将 离心管置于磁力架上,4 ℃静置 5-10 min,使磁珠聚集,弃上清。9. 残余液体去除。将装有磁珠沉淀的离心管转入离心机,3000 g,4 ℃离心 1 min,用移液器吸尽 管中残余液体。10. 外泌体洗脱。加入 0.2-0.5 ml Buffer EXE(PBS 或 ddH2O),剧烈振荡(Vortex)30 sec。11. 外泌体收集。7000 g,4 ℃离心 2 min,将离心管置于磁力架上(可以有效聚集磁珠,防止磁珠 散落在溶液中,降低外泌体纯度),转移上清至新的 EP 管中,即为纯化的外泌体溶液。12. 过滤。利用 PBS 润洗针式过滤器 C(即用滤器过滤 5 ml PBS),并利用针式过滤器 C 过滤外 泌体溶液,除去杂质,得到高纯度的外泌体溶液。13. 纯化的外泌体溶液可立即用于粒径检测(NTA 分析),或保存在-80 ℃。
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