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优利科(上海)生命科学有限公司
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50
产品名称:超快非醇核酸沉淀剂
规格:30次
使用说明书:随货寄送
用途:仅供科研实验,不作临床诊断和食品加工等其他用途
优势:现货供应,公司直销,提前预定的客户可获取新批次产品,我司为专营生物试剂的公司,严格按照国家规定和生产标准进行,保质保量,请客户放心购买
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核酸概述:
一、核酸的分类
生物的核酸包括脱氧核糖核酸DNA和核糖核酸RNA两大类;细胞中的RNA包括mRNA、tRNA、rRNA三大类。
二、生物的遗传物质
1.某些病毒以RNA为遗传物质。这些病毒又叫做RNA病毒,所含核酸也只有RNA。如HIV、H1N1、SARS、烟草花叶病毒等。
2.还有某些病毒以DNA为遗传物质,这些病毒又叫做DNA病毒,所含核酸也只有DNA。如T2噬菌体等。
3.以细胞为结构和功能基本单位的生物,细胞中同时含有DNA和RNA。
包括所有的原核生物、真核生物。这些生物都以DNA为遗传物质,而不以RNA为遗传物质。
三、核酸的分布
1.RNA病毒的RNA由核衣壳包裹,不与组蛋白结合成染色体。
2.原核细胞的RNA分布在细胞质基质、核糖体中,不与组蛋白结合成染色体。
3.真核细胞的RNA分布在细胞核、细胞质基质、线粒体、叶绿体、核糖体中,不与组蛋白结合成染色体。
4.DNA病毒的DNA由核衣壳包裹,不与组蛋白结合成染色体。
5.原核细胞的DNA分布在拟核、质粒中,不与组蛋白结合成染色体。
6.真核细胞的DNA主要分布在细胞核中,与组蛋白结合成染色体。
7.真核细胞的线粒体、叶绿体两种细胞器也具有自己的DNA和RNA。但都不与组蛋白结合成染色体。

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文献和实验细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中PH小于8时,溶菌酶作用受到抑制。葡萄糖:增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械切力作用降解。EDTA的作用:(1)螯合Mg2+ 、Ca2+ 等金属离子,抑制脱氧核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时一定的金属离子作辅基)。(2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。2.溶液Ⅱ--NaOH-SDS液:NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是稳定的。但当pH>12或pHSDS
上的电荷,减少相斥力而互相聚合,后者是因为钠盐与SDS-蛋白复合物作用后,能形成较小的钠盐形式复合物,使沉淀更完全。 4.为什么用无水乙醇沉淀DNA? 用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。 DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相
(酶抑制物残留) 要求很高。 4:彻底匀浆是提高得率和降低降解的关键。 5:检查 RNA 的完整性电泳检测,28S:18S =2:1 是完整的标志,1:1 对大部分实验也是可以接受的。 6:去除 DNA用于 RT-PCR, array analysis 最好用 Dnase I 去除 DNA。 7:降低外源酶的污染 – 不能从外面又导入酶。 8:低浓度的核酸浓缩时,要加入助沉淀试剂。但要防止助沉淀剂含酶及 DNA 污染。 9:彻底溶解 RNA,必要时可以 65C 加热
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