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100
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1年
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优利科(上海)生命科学有限公司
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常温
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50
产品名称:长效SDS-PAGE上样液
规格:1ml
使用说明书:随货寄送
用途:仅供科研实验,不作临床诊断和食品加工等其他用途
优势:现货供应,公司直销,提前预定的客户可获取新批次产品,我司为专营生物试剂的公司,严格按照国家规定和生产标准进行,保质保量,请客户放心购买
提供服务:免费代测、抗体标记、化学品定制、抗体定制以及各种技术服务。


核酸概述:
一、核酸的分类
生物的核酸包括脱氧核糖核酸DNA和核糖核酸RNA两大类;细胞中的RNA包括mRNA、tRNA、rRNA三大类。
二、生物的遗传物质
1.某些病毒以RNA为遗传物质。这些病毒又叫做RNA病毒,所含核酸也只有RNA。如HIV、H1N1、SARS、烟草花叶病毒等。
2.还有某些病毒以DNA为遗传物质,这些病毒又叫做DNA病毒,所含核酸也只有DNA。如T2噬菌体等。
3.以细胞为结构和功能基本单位的生物,细胞中同时含有DNA和RNA。
包括所有的原核生物、真核生物。这些生物都以DNA为遗传物质,而不以RNA为遗传物质。
三、核酸的分布
1.RNA病毒的RNA由核衣壳包裹,不与组蛋白结合成染色体。
2.原核细胞的RNA分布在细胞质基质、核糖体中,不与组蛋白结合成染色体。
3.真核细胞的RNA分布在细胞核、细胞质基质、线粒体、叶绿体、核糖体中,不与组蛋白结合成染色体。
4.DNA病毒的DNA由核衣壳包裹,不与组蛋白结合成染色体。
5.原核细胞的DNA分布在拟核、质粒中,不与组蛋白结合成染色体。
6.真核细胞的DNA主要分布在细胞核中,与组蛋白结合成染色体。
7.真核细胞的线粒体、叶绿体两种细胞器也具有自己的DNA和RNA。但都不与组蛋白结合成染色体。

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文献和实验试剂耗材:SDS、甘油、Tris、溴酚蓝、丙烯酰胺、甲叉丙烯酰胺、TEMED,APS、甘氨酸、甲醇、PVDF膜、Brandford蛋白定量试剂盒、BSA、脱脂奶粉、考麻斯亮蓝、丽春红、氯化钠、氯化钾、DTT、ECL、显影液、定影液等、显影胶片。 仪器设备:超声仪、核酸蛋白定量仪、Western-blot电泳转膜系统、摇床、曝光合、红灯等。 样本准备:收集106细胞,加入150μl SDS裂解液,冰上超声5次,定量。 SDS-PAGE 电泳: 1. 准备各溶液:小烧杯两个
(二)实验仪器及耗材 垂直电泳槽 稳压稳流电泳仪/ 电转仪 蛋白变性用加热仪器 无菌Tip 头、 Ep 管、碎冰 、注射器等 (三)实验步骤 1 .制备SDS-PAGE 凝胶 (1 )准备SDS-PAGE 凝胶用玻璃槽: 将两条垫片放入两块特制玻璃板中间(其中一块为凹形),用透明胶带将两边及底边封 严。确定灌制分离胶液面标志线(距样品梳子底部约0.5-1.0cm 处)。 (2 )配制10%SDS-PAGE 分离胶 (15ml) : 去离子水 5.9ml 30% 丙烯
,15500×g离心30分钟,取上清,进行蛋白质定量。单向定量电泳取蛋白质分子量标准物,第一次按1∶2稀释后,以后按1∶3倍比例逐级稀释,经4级稀释后,取15μl上样液上样,β-半乳糖苷酶上样量依次分别为1μg、0.24μg、0.062μg、0.0156μg、0.004μg。作12g/L SDS-聚丙烯酰胺凝胶单向电泳,同时电泳4份胶,显色以确定染色灵敏度。双向电泳取300μl样品液沿水化盘中槽的边缘自左向右线性加入,将17cm IPG胶条胶面朝下置于槽中,静置45分钟后覆盖矿物油,在20℃溶胀11~16
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