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100
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/
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1年
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
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常温
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50
产品名称:硅胶膜离心吸附柱再生液
规格:500次
使用说明书:随货寄送
用途:仅供科研实验,不作临床诊断和食品加工等其他用途
优势:现货供应,公司直销,提前预定的客户可获取新批次产品,我司为专营生物试剂的公司,严格按照国家规定和生产标准进行,保质保量,请客户放心购买
提供服务:免费代测、抗体标记、化学品定制、抗体定制以及各种技术服务。


核酸概述:
一、核酸的分类
生物的核酸包括脱氧核糖核酸DNA和核糖核酸RNA两大类;细胞中的RNA包括mRNA、tRNA、rRNA三大类。
二、生物的遗传物质
1.某些病毒以RNA为遗传物质。这些病毒又叫做RNA病毒,所含核酸也只有RNA。如HIV、H1N1、SARS、烟草花叶病毒等。
2.还有某些病毒以DNA为遗传物质,这些病毒又叫做DNA病毒,所含核酸也只有DNA。如T2噬菌体等。
3.以细胞为结构和功能基本单位的生物,细胞中同时含有DNA和RNA。
包括所有的原核生物、真核生物。这些生物都以DNA为遗传物质,而不以RNA为遗传物质。
三、核酸的分布
1.RNA病毒的RNA由核衣壳包裹,不与组蛋白结合成染色体。
2.原核细胞的RNA分布在细胞质基质、核糖体中,不与组蛋白结合成染色体。
3.真核细胞的RNA分布在细胞核、细胞质基质、线粒体、叶绿体、核糖体中,不与组蛋白结合成染色体。
4.DNA病毒的DNA由核衣壳包裹,不与组蛋白结合成染色体。
5.原核细胞的DNA分布在拟核、质粒中,不与组蛋白结合成染色体。
6.真核细胞的DNA主要分布在细胞核中,与组蛋白结合成染色体。
7.真核细胞的线粒体、叶绿体两种细胞器也具有自己的DNA和RNA。但都不与组蛋白结合成染色体。

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文献和实验【样品】冻存的全血样本 【样品准备】 将冻存的血液样品充分融化后混匀。 【操作步骤】 1.活化硅胶膜 将吸附柱放入收集管中,加入250 ul Buffer BL,12,000 g离心1 min,活化硅胶膜。 2.样品消化 (1)取20 ul Proteinase K至1.5 ml离心管底部,然后加入200 ul充分混匀的全血样品,涡旋振荡10 s。 (2)加入200 ul Buffer gA1,旋涡振荡10 s,70℃孵育1 h,期间震荡1 ~ 2次。 3.孵育结束后加入200 ul无水
(尤其质粒较大时) : 洗脱溶解质粒时,可适当加温或延长溶解时间。 16. 乙醇残留: 漂洗液洗涤后应离心尽量去除残留液体,再加入洗脱缓冲液。 17. 洗脱液加入位置不正确: 洗脱液应加在硅胶膜中心部位以确保洗脱液会完全覆盖硅胶膜的表面达到最大洗脱效率。 18. 洗脱液不合适: DNA 只在低盐溶液中才能被洗脱,如洗脱缓冲液 EB(10mM Tris-HCl, 1mM EDTA,pH8.5)或水。洗脱效率还取决于 pH 值,最大洗脱效率在pH 7.0-8.5 间。当用水洗脱时确保其 pH
,不同样品的细胞破壁方式可参照前面的详细介绍。样品量过多导致细胞裂解不充分加样量过多使裂解液和样品混合不均匀,细胞裂解不充分。不同来源样品的加样量请参照详细操作步骤。 DNA吸附不充分如在上吸附柱前未加无水乙醇,或用低浓度乙醇代替无水乙醇,则导致DNA不能充分沉淀,与硅胶膜吸附不彻底,因此应在样品裂解后加适量无水乙醇,再上吸附柱使DNA与硅胶膜充分吸附。 DNA洗脱不适当洗脱液pH值过低会降低洗脱效率,应确保洗脱液pH值在7.0-8.5之间;洗脱体积若小于30μl,则不易完全浸透硅胶膜
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