- ￥228 - 618
- 博尔森/BIOESN
- BES21375KB
- 中国
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
5×Coomassie brilliant blue G-250 Solution
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100mL /500mL
| 规格： | 100mL | 产品价格： | ￥228.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 500mL | 产品价格： | ￥618.0 |
5×考马斯亮蓝G-250溶液（蛋白定量用)
保存条件：2-8℃保存，保质期一年。
包装清单：
产品简介：
Bradford 蛋白浓度测定试剂盒(Bradford Protein Assay Kit)是根据最常用的两种蛋白浓度检测方法之一Bradford 法研制而成，实现了蛋白浓度测定的快速，稳定和高灵敏度。
检测速度极快，10-20 个样品只需不足 10 分钟即可完成。
灵敏度高，检测浓度下限达 25ug/ml，最小检测蛋白量达到 0.5ug，待测样品体积为 1-20ul。
在 50-1000ug/ml 浓度范围内有较好的线性关系。
Bradford 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达 5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保 SDS 低于 0.05%，Triton X-100低于 0.05%，Tween 20, 60, 80 低于 0.02%。含去垢剂的样品推荐使用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒(SK1070)。
每个试剂盒可以检测 250 个样品。
使用说明：
1. 完全溶解蛋白标准品，取 10ul 稀释至 250ul ，使终浓度为 0.2mg/ml。蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用 0.9%NaCl 或 PBS 稀释标准品。
2. 将标准品按 0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20ul 加到 96 孔板的标准品孔中，加标准品稀释液补足到 20ul。
3. 加适当体积样品到 96 孔板的样品孔中，加标准品稀释液到 20ul。
4. 各孔加入 200ul 稀释后 1×G-250 染色液（1:4 加水稀释，现配现用），室温放置 3-5 分钟。
5. 用酶标仪测定 A595，或 560-610nm 之间的其它波长的吸光度。
6. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
注意事项：
1. G-250 染色液使用前请颠倒 3-5 次，混匀。
2. 蛋白标准请在全部溶解后先混匀，再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。
3. 将 G-250 染色液回复到室温再使用，有利于提高检测的灵敏度。
4. 需可检测 560-610nm 之间波长的酶标仪一台，最佳检测波长为 595nm。并需 96 孔板。
5. 请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验试剂 考马斯亮蓝G-250 的配制：称取100mg 考马斯亮蓝G-250，溶于50mL90％乙醇中，加入85％（W／V）的磷酸100mL，最后用蒸馏水定容到1 000mL。此溶液在常温下可放置一个月。 （3）乙醇 （4）磷酸（85％）四、操作步骤 1．标准曲线制作 （1）0~100μg／mL 标准曲线的制作：取6 支10mL 干净的具塞试管，按表1 取样。盖塞后，将各试管中溶液纵向倒转混合，放置2min 后用1cm
一般R250 染蛋白，G250 一般测蛋白浓度，也可染胶，敏感性更高但较慢脱色较难。 G250常用的蛋白染料，作定性试验用,染色后为蓝绿色;R250较敏感,，做定量实验用,染胶效果较好.染色后为红蓝色 考马斯亮蓝R250（Coomassie brilliant blue R250）。C45H44O7H3S2Na，MW=824，λmax
一、原理：考马斯亮蓝G—250法于1976年由Bradform建立。考马斯亮蓝G—250具有红色和蓝色两种色调，在酸性溶液中，其以游离态存在呈棕红色，当它与蛋白质通过疏水作用结合后，变为蓝色。色素对可见光谱的最大吸收值从465nm转移到595nm处。蛋白质和色素的结合反应很快速，约在2分钟左右的时间内达到平衡，在室温1小时之内是稳定的。在0．01一1.0mg蛋白质／m1范围内，蛋白质含量与A 595值呈正比。二、染液配制： 100mg的考马斯克蓝G—250溶解于50m1 95％的乙醇中，加入
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