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50
- 英文名:
20% PEG8000-NaCl solution(2.5M NaCl)
- 供应商:
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
500mL
储存条件:2-8℃
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文献和实验要去除内毒素可延长至12小时),再用5-10个体积去离子水冲洗。 3. 去除强离子吸附蛋白:使用1.5M NaCl洗柱子,约10-15分钟,然后用大约10个体积去离子水冲洗。 4. 挂镍:加入0.5ml(1ml柱子)或者2.5ml(5ml柱子)0.1M的NiSO4,使用5个柱体积的去离子水冲洗,再用缓冲液冲洗5个柱体积,最后置换到20%乙醇中保存。 Ni excel系列 可以定期使用NaOH进行彻底的在位清洗。使用NaOH能够比较彻底地清除各类蛋白的杂质,便于延长柱子的使用寿命。使用不同
积的缓冲液平衡,切勿长时间的将柱子保存在NaOH溶液中。 如果常规清洗仍无法达到理想的效果,可以根据残留物的不同选择其它的清洗方式:例如:0.5M 醋酸溶液,1M NaOH,8M尿素或者6M 盐酸胍(针对蛋白沉淀),30%异丙醇(对于脂类或者疏水物质),再者还可以考虑使用胃蛋白酶(1mg/ml溶于0.1M醋酸、0.5MNaCl中)消化,再使用NaOH清洗。 5. 保存:如果超过2天不使用层析柱,建议使用2倍柱体积的水冲洗柱子后再使用2倍柱体积的20%乙醇冲洗柱子保存。(Hiload Superdex
【共享】大批量、廉价、用于测序的PCR产物纯化方法--PEG沉淀
,其他与常规PCR一致),此目的是验证一下PCR体系里面的盐离子对PEG沉淀是否有影响。 总起来,结果还比较满意,可以看到,PEG浓度越高,能沉淀出来的DNA片段越小,并且,PCR反应体系里面的盐离子对PEG沉淀影响似乎不大,我测序的标本都在300bp以上,所以,最终选择的PEG浓度为12%。 方法: 96孔PCR板操作。 1、20μLPCR产物加入5μL 5M的NaCl(终浓度0.5M); 2、加入25μL 24%的PEG8000溶液(终浓度12%);混匀; 3、4度放置
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