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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
EB Solution(10mg/ml)
- 供应商:
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件:
RT
- 规格:
5mL /100mL /5mL×10
| 规格: | 5mL | 产品价格: | ¥178.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100mL | 产品价格: | ¥618.0 |
| 规格: | 5mL×10 | 产品价格: | ¥488.0 |
EB溶液(10mg/mL)
EB 核酸染料特点
溴化乙锭是一种高度灵敏的嵌入性荧光染色剂,为强致癌诱变剂,但价格便宜。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中,大约每 2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。EB的这种特性使其成为一种核酸染料,常用于琼脂糖凝胶电泳中的核酸染色。
溴化乙锭在紫外区302nm和366nm处 有吸收峰,在紫外光的照射下,溴化乙锭可被激发出橙红色的荧光(590nm)。结合有DNA的溴化乙锭复合物的荧光强度要比没有结合DNA的染料高出 20-30倍,因此溴化乙锭可检测到少至10ng的DNA条带,非常灵敏
EB 使用方法
1.胶染法
1.1 制胶时加入GelRed核酸染料。每100mL胶中加入2-5μL EB 核酸染料。
1.2 按照常规方法进行电泳即可。
2.泡染法
2.1 按照常规方法进行电泳。
2.2 用 1×电泳缓冲液稀释 EB 溶液至 0.5-1ug/mL 的浓度,将电泳后的琼脂糖胶浸泡在 EB溶液中,摇床摇晃 10-20 分钟。染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的稀释溶液轻轻地倒在胶板上,让稀释液均匀地覆盖整个胶板,并染色 30 分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
注:用泡染法染色时,染料用量较多。单次制备的染色溶液可重复使用 3 次左右。 几种核酸染料比较

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文献和实验Cat# LY5010):2、6×电泳载样缓冲液(德元国际Cat# LY50013): 3、溴化乙锭(EB)溶液母液:将EB配制成10mg/ml,用铝箔或黑纸包裹容器,储于室温即可。四、琼脂糖凝胶的制备1、取5×TBE缓冲液20ml加水至200ml,配制成0.5×TBE稀释缓冲液,待用。2、胶液的制备:称取0.4g琼脂糖,置于200ml锥形瓶中,加入50ml 0.5×TBE稀释缓冲液,放入微波炉里(或电炉上)加热至琼脂糖全部熔化,取出摇匀,此为0.8%琼脂糖凝胶液。加热过程中要不时摇动,使附于瓶
Standard neutral agarose electrophoresis
8. 1 x TAE buffer - 40mM Tris-acetate, 2mM EDTA, pH 8. 10mg/ml ethidium bromide stock solution 10 x Type III loading buffer (50% glycerol, 0.5% bromophenol blue, 0.5% xylene cyanol, this solution should be stored at 4°C) N.B: Extreme caution
,Rb,TopoismeraseⅡ 等。 2、酶消化方法 常用 0.1% 胰蛋白酶和 0.4% 胃蛋白酶液。胰蛋白酶使用前预热至 37℃,切片也预热至 37℃,消化时间约为 5~30 分钟(胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整,浓度范围可以从 0.05% 至 0.25% ); 胃蛋白酶消化37℃ 时间为 30 分钟。皂素(Saponin):一般使用浓度为2~10mg/ml的saponin 溶液,消化时间为室温孵育 30 分钟。 适用于被固定遮避的抗原,其中有:Collagen
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