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- 2026年03月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
1000
- 英文名：
Panbio Dengue IgG Indirect ELISA
- 保质期：
有效期24个月
- 供应商：
健仑生物
- 保存条件：
2～8℃避光保存
- 规格：
面议
英文名：Panbio Dengue IgG Indirect ELISA
预期用途
Panbio Dengue IgG Indirect ELISA用于定性检测登革热病原血清型（1、2、3和4）血清中的IgG抗体，仅限科研使用
概述
虫媒病毒中的登革热属通过蚊子传播，主要是埃及伊蚊和白纹伊蚊。 登革热病毒感染，与伤寒病有关，其特征是突然发热、剧烈头痛、肌痛、关节痛和皮疹。 登革热感染的严重并发症包括登革出血热和登革休克综合征。此类并发症的发病率增加与继发性感染不同登革热血清型有关。
通过ELISA对四种登革热血清型的IgG类特异性抗体进行检测，是一种诊断既往感染登革热病毒的患者的重要方法。 配对血清中IgG, 水平不断升高是活动性登革热感染的表现。传统上，血凝抑制试验（HAI）滴度被用于划分原发性或继发性感染。当前的界定方法是采用及时分离至少7天的配对血清标本检测，急性标本的HAI滴度≥ 1:2560被认为患者感染了继发性黄病毒1。
检测原理
血清中存在的登革热病毒抗体，与微孔测试条上聚苯乙烯表面附着的登革热抗原结合物相结合。 洗去剩余的血清并添加过氧化物酶标记的抗人IgG抗体。清洗微孔，再添加无色的底物系统 - 四甲基联本安/过氧化氢（TMB显色液）。底物被酶水解后，显色液变蓝。用酸终止反应后，TMB变黄。显色表示测试样本中存在登革热IgG抗体。
提供的材料
登革热抗原（血清型1、2、3和4）包被微孔板-（12x8孔）。即用型。未使用的微孔应该立即重新密封并储存于干燥环境中。有效期内储存于2-8℃可保持稳定。
清洗缓冲液（20倍） - 1瓶，60mL 20倍浓缩磷酸盐缓冲盐水（pH 7.2 – 7.6），含吐温 20和防腐剂（0.1% Proclin™）。低温可能结晶。若去除结晶，可在37℃孵育液体至澄清。混合均匀。用19体积的蒸馏水稀释1体积的清洗缓冲液。稀释后的缓冲液可在2-25℃储存一周。
样本稀释剂 – 2瓶， 50 mL（粉色）。即用型。Tris缓冲生理盐水（pH 7.2 – 7.6），含防腐剂（0.1% Proclin™）和添加剂。有效期内储存于2-8℃可保持稳定。
HRP标记抗人IgG – 1瓶，15mL（绿色）。即用型。辣根过氧化物酶（HRP）标记山羊抗人IgG，含防腐剂（0.1% Proclin™）和蛋白稳定剂。有效期内储存于2-8℃可保持稳定。
TMB显色液（TMB） - 1瓶，15mL。即用型。3,3’,5,5'-四甲基联本安和过氧化氢的混合物，存放于枸橼酸盐缓冲液中（pH 3.5 – 3.8）。有效期内储存于2-8℃可保持稳定。
阳性质控品 – 1瓶，红色瓶盖，200μL人血清（含0.1%叠氮HUA钠和0.005%硫酸庆大霉素）。有效期内储存于2-8℃可保持稳定。
校准品 – 1瓶，黄色瓶盖，850μL人血清（含0.1%叠氮HUA钠和0.005%硫酸庆大霉素）。有效期内储存于2-8℃可保持稳定。
阴性质控品 – 1瓶，绿色瓶盖，200μL人血清（含0.1%叠氮HUA钠和0.005%硫酸庆大霉素）。有效期内储存于2-8℃可保持稳定。
终止液 – 1瓶，红色瓶盖，15mL。即用型。1M磷酸。有效期内储存于2-25℃可保持稳定。
需要但未提供的材料
精确、可调节的微量移液器，含一次性吸液头（5-1000 μL容积）
去离子水
标板清洗系统
酶标仪，含450nm滤波器
计时器
刻度量筒
烧瓶
试管或微滴定板，用于稀释血清
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文献和实验中的其他成份在洗涤过程中被洗去。 3）加酶标抗抗体。可用酶标抗人Ig以检测总抗体，但一般多用酶标抗人IgG检测IgG抗体。固相免疫复合物中的抗体与酶标抗体抗体结合，从而间接地标记上酶。洗涤后，固相载体上的酶量与标本中受检抗体的量正相关。 4）加底物显色。本法主要用于对病原体抗体的检测而进行传染病的诊断。 间接法的优点是只要变换包被抗原就可利用同一酶标抗抗体建立检测相应抗体的方法。间接法成功的关键在于抗原的纯度。虽然有时用粗提抗原包被也能取得实际有效的结果，但应尽可能予以纯化，以提高试验的特异性。特别应注意
。血清中的特异抗体与固相抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体上只留下特异性抗体，血清中的其他成份在洗涤过程中被洗去。 （3）加酶标抗抗体。可用酶标抗人Ig以检测总抗体，但一般多用酶标抗人IgG检测IgG抗体。固相免疫复合物中的抗体与酶标抗体抗体结合，从而间接地标记上酶。洗涤后，固相载体上的酶量与标本中受检抗体的量正相关。 （4）加底物显色 本法主要用于对病原体抗体的检测而进行传染病的诊断。间接法的优点是只要变换包被抗原就可利用同一酶标抗抗体建立检测相应抗体的方法。 间接法成功
总抗体或IgG抗体。如用抗原包被的间接法直接测定IgM抗体，因标本中一般同时存在较高浓度的IgG抗体，后者将竞争结合固相抗原而使一部份IgM抗体不能结合到固相上。因此如用抗人IgM作为二抗，间接测定IgM抗体，必须先将标本用A蛋白或抗IgG抗体处理，以除去IgG的干扰。在临床检验中测定抗体IgM时多采用捕获包被法。先用抗人IgM抗体包被固相，以捕获血清标本中的IgM(其中包括针对抗原的特异性IgM抗体和非特异性的IgM)。然后加入抗原，此抗原仅与特异性IgM相结合。继而加酶标记针对抗原的特异性抗体
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