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文献和实验基本原理 TNF的生物学活性之一是能直接杀伤肿瘤细胞。TNF与相应受体结合后向细胞内移,被靶细胞溶酶体摄取导致溶酶体稳定性降低,各种酶外泄,引起细胞溶解。肿瘤细胞株对TNF-α的敏感性有很大的差异,用放线菌素D、丝裂酶素C、放线菌酮等处理肿瘤细胞,可明显增强TNF-α杀伤肿瘤细胞活性。 材料和试剂 1,完全培养基(1)10%FCS-DMEM培养液(V/V)。 2,完全培养基(2)3%FCS-DMEM培养液(V/V)0.5-1μg/ml放线菌素-D。 3,0.05%结晶
AlamarBlueTM 摄入法 1、按MTT检测法培养细胞和用不同稀释度的细胞因子处理细胞。2、在培养结束前24小时加入Alamar Blue染料,96孔细胞培养板每孔20μl。3、在培养结束后,直接在酶联检测仪上测定光吸收值。氧化型Alamar Blue的最大光吸收在570nm,用OD570 减去OD600 即为活细胞还原的Alamar Blue染料,颜色深浅与活细胞数成正比。
ICP光谱仪是由ICP光源、进样装置、分光装置、检测器和数据处理系统组成。其中ICP光源由高频发生器、石英炬管和高频感应线圈组成;进样装置是由蠕动泵(一些仪器直接利用同心雾化器提升)、雾化器和雾室等组成;分光装置由入射狭缝、分光元件、若干光学镜片组成及出射狭缝(全谱直读型没有);检测器现在用的主要是光电倍增管和固体成像器件(目前主要有CCD和CID);数据处理系统主要有计算机、数据通讯版和仪器控制及数据处理软件组成。高频发生器:高频发生器是ICP-OES的基础核心部件,是为等离子体提供
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