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上海圻明生物
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Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase 14 (MAPK14)
丝裂原激活蛋白激酶14(MAPK14)重组蛋白,人片段与标签等更多信息欢迎咨询销售商。重组蛋白是应用了重组 DNA 或重组 RNA 技术而获得的蛋白质。重组蛋白已被广泛应用于蛋白结构研究、重组蛋白药物、诊断试剂开发、抗体药物靶点、免疫检测试剂等研究领域。用于生产重组蛋白的宿主细胞主要是细菌 (大肠杆菌)、哺乳动物细胞、昆虫细胞和酵母。
丝裂原激活蛋白激酶14(MAPK14)重组蛋白,人热稳定性由目标蛋白的损失率来描述。损失率采用加速热降解试验测定,即37℃孵育48h,未见明显降解和沉淀。 (参照中国生物制品标准,由阿伦尼乌斯方程计算得出。)在适当的储存条件下,该蛋白质在保质期内的损失小于5%。
重组蛋白何选购?

重组蛋白表达系统一般可以分为:
【原核表达系统】:是指在细菌中表达蛋白质的系统,原核表达系统具有简单、高效、易于扩大规模的优点,广泛用于生产大量纯化蛋白质。原核表达系统可以分为两种类型:大肠杆菌表达系统和其它细菌表达系统,大肠杆菌表达系统是研究最早、最为成熟也最为常用的表达系统。原核表达系统具有成本低、表达量高等优点,但缺乏翻译后修饰机制,不适用于需要糖基化或特定位点切割等修饰的蛋白表达。
【真核表达系统】:是指在真核细胞中表达蛋白质的系统,可以实现不同程度的糖基化等翻译后修饰,更接近于来自真核蛋白的天然活性。真核表达系统可以分为四种类型:酵母表达系统、昆虫表达系统、植物细胞表达系统和哺乳动物细胞表达系统。
【酵母表达系统】:常用的酵母细胞包括酿酒酵母、毕赤酵母等,酵母细胞生长速度快、培养条件简单,既可高密度发酵又可以进行正确的蛋白质折叠和翻译后修饰,是一种良好的蛋白表达系统。该系统可以实现大量表达蛋白质,并且具有易于纯化和高度可控的优点。
【昆虫细胞表达系统】:是一种真核蛋白高表达体系,适合于一些在原核体系难以表达的蛋白,比如膜蛋白、大分子质量蛋白、蛋白激酶等,常用的昆虫表达系统包括杆状病毒表达系统、多角体病毒表达系统。
【无细胞表达系统】:可以从质粒和PCR产物直接表达目的蛋白,表达体系是来自于大肠杆菌、麦胚、兔网织红细胞等的无细胞提取物。无细胞蛋白表达的优点是可自动化表达其它系统难以表达的产物,通量高,但表达量低、成本高昂。
【植物细胞表达系统】:通常使用农杆菌介导的转化方法,将表达载体导入到植物细胞中进行表达。植物细胞具有高效的蛋白质修饰和表达能力,同时还可以进行正确的蛋白质折叠和组装。这种表达系统不仅能够表达蛋白质,还可以进行疫苗和生产重组蛋白质等方面的应用。
【哺乳动物表达系统】:在蛋白的起始信号、加工、分泌、糖基化方面具有独特优势,适合表达完整的大分子蛋白,在活性方面也远胜于原核表达系统及酵母、昆虫细胞等真核表达系统,但构成复杂、操作技术要求高、表达产量不大、产率低。
考虑融合标签的影响。任何一类标签处于氨基酸序列的任一位置,都具有影响目的蛋白表达或功能的可能性。主要原因是标签可能会干扰蛋白的正确折叠,致使目的蛋白失活或形成包涵体。其次,标签可能会中断亚细胞定位信号,这种情况下,蛋白能够正确翻译和折叠,但在细胞内所处的位置是错误的。因此,您需要知道添加的标签对目的蛋白的表达是否有影响。
考虑是在N-端还是C-端标记。N-端或C-端标记的选择还需要根据蛋白结构、定位等特性。然而,倘若你没有确切的蛋白结构,或蛋白功能域图谱,建议分别构建N-端标记和C-端标记的表达克隆,以检测哪个更有效。
组织蛋白酶B(Cathepsin B)是一种半胱氨酸组织蛋白酶,属于半胱氨酸蛋白酶家族,是一种胞内酶,主要分布于细胞溶酶体中。
在病变情况下,也会分泌到细胞膜外周微环境或者胞外。组织蛋白酶B由一个重链和一个轻链组成的二聚体,具有羧基肽酶和内肽酶活性。
羧基肽酶活性使得组织蛋白酶B可选择性识别某些氨基酸序列以切割序列 C 端侧的肽键接头,例如缬氨酸-瓜氨酸(Val-Cit)、缬氨酸-丙氨酸(Val-Ala)和甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸(GGFG)等。
这些Linker在已获批的ADC中广泛应用,具体裂解过程如图2所示。内肽酶活性则使组织蛋白酶B参与细胞外基质的降解,从而涉及肿瘤的侵袭和转移。

重组蛋白哪里买?上海圻明优势供应重组蛋白欢迎咨询。
重组人组织蛋白酶B(Human Cathepsin B),该产品采用HEK293细胞表达,更接近蛋白天然构象,可用于评估ADC药物连接子切割效果,保证payload在胞内高效释放;
通过测定底物Z-RR-AMC的代谢减少速率来评估组织蛋白酶B的活性。孵育体系中组织蛋白酶B终浓度为2μg/ml,底物Z-RR-AMC终浓度为1μM,孵育时间为60min,最终测得组织蛋白酶B的活性为8000pmol/min/mg。

GAPDHS Mouse mAb
别名
GAPD2; GAPDH-2; GAPDS; HEL-S-278; HSD-35
反应物种
Human
宿主物种
Mouse
免疫原
Full length human recombinanti protein of human GAPDHS(NP_055179) produced in HEK293T
纯化方式
Affinity purification
Storage
Store at 4°C short term. Aliquot and store at -20°C long term. Avoid freeze/thaw cycles.
0.01M PBS, pH7.4, containing 0.05% Proclin-300, 50% glycerol.
Buffer 体系
Store at 4°C short term. Aliquot and store at -20°C long term. Avoid freeze/thaw cycles.
Liquid in PBS containing 0.05% Proclin-300, 50% glycerol.
Gene ID
26330 (Human);
蛋白编码
O14556
抗体分型
IgG2a
推荐稀释比
WB 1:2000< br/> IHC 1:150
应用
IHC, WB
Calculated MW
44.3 kDa
Observed MW
45 kDa
酪胺信号放大技术(Tyramide signal amplification,简称TSA),是一类利用HRP对靶标抗原进行高密度原位标记的酶学检测方法,可以应用于IF/IHC的信号放大。TSA技术主要原理:在过氧化氢H2O2存在时,辣根过氧化物酶HRP可以催化酪胺为一种非常活跃的短寿命中间体,在短时间内,中间体可以共价结合到周围蛋白的富电子表面形成酪胺化复合物,大量富集成以酶为中心的类似“岛”状的聚集团,因使用荧光染料标记的酪胺,使得抗原-抗体结合部位形成大量的荧光素沉积,实现信号放大。
酪胺信号放大技术可以用于检测用传统方法无法检出的低丰度靶标。基于酪胺的信号放大技术能够提供极强的灵敏度、检测极微量的目的抗原。酪胺信号放大技术极大的降低抗体的用量,节约抗体。酪胺信号放大试剂盒可与传统染色方法结合使用以多色成像,也可以顺序进行两个或更多个酪胺反应以标记一个样品上的不同靶标,因此可使用不同的荧光酪胺反复标记实现多重荧光染色。

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文献和实验圻明生物重组蛋白
位点的序列,包括肽库和肽芯片 [5,6] 的多种技术可用来鉴定激酶底物。此外,一种 λ 噬菌体 cDNA 表达文库的固相磷酸化筛选 [ 7,8 」以及不同蛋白质相互作用筛选方法,如覆盖方法 [ 9,11] 和酵母双杂交系统 [ 12,14] 已被应用在这方面。最近,蛋白激酶被改造成可接受人工合成的腺苷三磷酸盐(环戊基 ATP ) 模拟物,并用于鉴定特异底物。初步的研究已经证明,通过激酶来研究磷酸化的蛋白质芯片是可行的 [ 18,19] 。为了确定磷酸化位点,抗磷酸化蛋白表位 [6] 的抗体将用于蛋白
系统理论上的优缺点,并讨论蛋白质微阵列的应用将改变诊断方法和基因组和蛋白组的研究。 微小平行的微点配体结合分析的基本原理十年前就描述过。在“周围分析理论”中,Roger Ekins 及其同事 [14]解释了为什么微点分析比其他配体结合分析会更灵敏。那时,采用微小化的免役学分析系统已证明微点技术的高灵敏度和巨大的应用前景。但是,由微阵列引起的巨大兴趣来自DNA芯片的工作。在一个有海量平行方式的反应中测定几千个不同的结合反应的可能性完美地符合生物学中基因组方法的需要。全基因组测序方面的快速进展
和廉价的[12]。 在启动子下游是RBS,其跨度约为54个核苷酸,两端限定在 -35(±2)和mRNA编码序列的+19到+22之间[13]。Shine-Dalgarno(SD)位点[14,15]在翻译起始阶段与16S rRNA的3’端相互作用[16]。SD与起始密码子间的距离约为5-13bp[17],而且此区的序列在mRNA转录物中应避免出现二级结构,否则将会降低翻译起始的效率[18]。 在RBS的5’和3’端均为A丰富区[19]。转录终止子位于编码序列的下游,作为转录终止的信号
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