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999
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1年
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上海圻明生物
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2-8°C不超过一个月,-80°C不超过12个月
- 抗体英文名:
Recombinant Immunoglobulin superfamily, member 1 (IGSF1)
抑制素结合蛋白(IGSF1)重组蛋白,人片段与标签等更多信息欢迎咨询销售商。重组蛋白是应用了重组 DNA 或重组 RNA 技术而获得的蛋白质。重组蛋白已被广泛应用于蛋白结构研究、重组蛋白药物、诊断试剂开发、抗体药物靶点、免疫检测试剂等研究领域。用于生产重组蛋白的宿主细胞主要是细菌 (大肠杆菌)、哺乳动物细胞、昆虫细胞和酵母。
抑制素结合蛋白(IGSF1)重组蛋白,人热稳定性由目标蛋白的损失率来描述。损失率采用加速热降解试验测定,即37℃孵育48h,未见明显降解和沉淀。 (参照中国生物制品标准,由阿伦尼乌斯方程计算得出。)在适当的储存条件下,该蛋白质在保质期内的损失小于5%。
重组蛋白何选购?
考虑融合标签的影响。任何一类标签处于氨基酸序列的任一位置,都具有影响目的蛋白表达或功能的可能性。主要原因是标签可能会干扰蛋白的正确折叠,致使目的蛋白失活或形成包涵体。其次,标签可能会中断亚细胞定位信号,这种情况下,蛋白能够正确翻译和折叠,但在细胞内所处的位置是错误的。因此,您需要知道添加的标签对目的蛋白的表达是否有影响。
考虑是在N-端还是C-端标记。N-端或C-端标记的选择还需要根据蛋白结构、定位等特性。然而,倘若你没有确切的蛋白结构,或蛋白功能域图谱,建议分别构建N-端标记和C-端标记的表达克隆,以检测哪个更有效。
组织蛋白酶B(Cathepsin B)是一种半胱氨酸组织蛋白酶,属于半胱氨酸蛋白酶家族,是一种胞内酶,主要分布于细胞溶酶体中。
在病变情况下,也会分泌到细胞膜外周微环境或者胞外。组织蛋白酶B由一个重链和一个轻链组成的二聚体,具有羧基肽酶和内肽酶活性。
羧基肽酶活性使得组织蛋白酶B可选择性识别某些氨基酸序列以切割序列 C 端侧的肽键接头,例如缬氨酸-瓜氨酸(Val-Cit)、缬氨酸-丙氨酸(Val-Ala)和甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸(GGFG)等。
这些Linker在已获批的ADC中广泛应用,具体裂解过程如图2所示。内肽酶活性则使组织蛋白酶B参与细胞外基质的降解,从而涉及肿瘤的侵袭和转移。

重组人组织蛋白酶B(Human Cathepsin B),该产品采用HEK293细胞表达,更接近蛋白天然构象,可用于评估ADC药物连接子切割效果,保证payload在胞内高效释放;
通过测定底物Z-RR-AMC的代谢减少速率来评估组织蛋白酶B的活性。孵育体系中组织蛋白酶B终浓度为2μg/ml,底物Z-RR-AMC终浓度为1μM,孵育时间为60min,最终测得组织蛋白酶B的活性为8000pmol/min/mg。
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文献和实验树脂结构,6% 交联的琼脂糖 ● 「笑三少」-钙调蛋白树脂 钙调蛋白树脂用于亲和纯化钙调蛋白结合蛋白(CBP),包括带有 CBP 标签的重组蛋白和真核生物中钙调蛋白调控的蛋白。树脂是 4% 的琼脂糖偶联到钙调蛋白上,配基的密度是 1 ml 树脂大约是 1 mg 钙调蛋白。 钙调蛋白树脂有单独的树脂产品形式以及试剂盒形式,试剂盒包括: 5 ml 树脂, 100 ml 钙调蛋白结合/漂洗缓冲液, (50 mM Tris-HCl (pH7.5), 200 mM
亲和层析原理 亲和层析是一种通过生物分子之间的特异性相互作用来分离物质的层析方法,如酶和底物、抗原与抗体等非常专一的相互作用 (图9)。配基被固定在填料上,可以结合相应的生物分子,再采用合适的方法如降低pH值、离子强度等,或添加和配基或者目的分子类似的基团,使目标分子以活性的形式被洗脱。 图9 亲和层析原理 特点 速度快,操作简单,可以快速将目标蛋白与大量杂质进行分离 特异性高,经常一步即可达到大于90%的纯度 配基种类繁多,填料选择性高 (包括纯化标签抗体蛋白、抗体、酶类、DNA结合蛋白
的,但是这结果是不是假阳性呢?还得做个阴性对照。阴性对照如何设置呢?考虑到整个实验体系会出现 beads、抗X抗体、诱饵蛋白 X、靶蛋白 Y(co-IP): 可能出现的假阳性来源 需要的阴性对照 抗 X 抗体结合非特异的蛋白 与 IP 一抗种属亚型相同的免疫球蛋白(比如,抗 X 抗体是 Mouse IgG,阴性对照可使用 Mouse 免疫球蛋白) beads 对蛋白的非特异结合* 同上,此外还可进行 Pre clear,IP 正式实验前排除非特异结合蛋白。如果使用琼脂
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