- ￥938 - 1658
- 博尔森/BIOESN
- BES20084KB
- 中国
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
Quick Yeast Transformation Kit
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
20T /50T
| 规格： | 20T | 产品价格： | ￥938.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50T | 产品价格： | ￥1658.0 |
酵母菌落快速转化试剂盒（一步法）
储存条件： -20 ℃储存，未开封有效期 24 个月。
产品内容：
产品介绍：
酵母菌落快速转化试剂盒是以未经冻存的酿酒酵母平板菌落（无需摇菌）或者菌液作为菌体来源（短期 4 ℃保存的平板或者菌液亦可使用），无需制备感受态细胞，无需分步热激，一步转化，整个操作流程在 90 min 内完成。省去了通过两次培养获得状态良好的菌体的过程，以及制备感受态的过程，节省了 1-2天的菌种培养转化时间，或者购买感受态的经费。其转化率可达经典酵酿酒母转化方法（SK2400）的 50-80%（常规酵母杂交菌种检测）。转化效率可满足除文库传化之外的其它转化实验。
菌落转化步骤：
1. 在无菌的 1.5 mL 的离心管中加入 100 μL 的 P1 溶液（转化液）。
2. 在上述转化液中加入 1 μg 的质粒 DNA。共转加入每种质粒各 1 μg。
3. 挑取 2-3 个较大酵母菌落加入上述转化液中，震荡混匀。
4. 置于 42 ℃水浴 60 min（每隔 20 min 颠倒混匀一次，避免酵母菌沉底）。
5. 可选步骤：3,000 rpm 离心 3 min，弃上清。用 400 μL YPD Plus Liquid Medium（YT0004）重悬，30 ℃摇床震荡培养 30-60 min。YPD Plus 用于转化后复苏酵母菌，转化效率可以提高 50-100%。
6. 3,000 rpm 离心 3 min，弃上清。加入 100 μL 无菌水重悬菌体。
7. 将重悬菌体全部涂布于相应的缺陷型培养基平板上。
8. 30 ℃恒温培养 3-5 天，直至平板长出菌落。
菌液转化步骤：
收集 1.5-3 mL 酵母菌液沉淀后，加入 100 μL P1 溶液（转化液）和 1 μg 质粒 DNA 后震荡混匀。后续步骤和平板菌落转化步骤 4-8 相同。
注意事项：
1. 转化全程要求无菌操作。
2. 为了保证转化效率，感受态不宜直接用液氮冻存。
3. 增加酵母质粒的纯度和浓度可以提高转化效率。
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