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10×BU溶液(pH7.0,过
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50
10×BU Buffer
上海博尔森生物科技有限公司
2-8℃
100mL /500mL
10×BU溶液(pH7.0,过滤除菌)
储存条件:常温保存,X-gal 储存液-20℃保存,有效期一年。
产品内容:
产品介绍:
本试剂用于 EGY48 酵母杂交系统中,LacZ 报告基因的检测;当有互作发生,lacz 报告基因表达,生成β-半乳糖苷酶,将 x-gal 切割成半乳糖和深蓝色的底物 5-溴-4 氯靛蓝。每个成分可以单独提供,或直接购买套装。
试剂准备:
1. 筛选培养基配置:请将 0.5L 的 SD/-Trp/-Ura with Agar 干粉,加入 500mL 的蒸馏水中,搅拌后于 115℃灭菌 20min 后倒板;
注意:灭菌的培养基如有剩余,可置于超净台密封保存,再次使用时微波加热溶解后倒板即可。
2. 显色培养基配置:
注意:半乳糖、棉子糖以及 x-gal 请在灭菌后,培养基冷却到 55℃ 之后加入。半乳糖和棉子糖由于加入体积较大,请先置于 55℃ 预热后加入,放置凝固过快。
显色平板请尽快使用。3 天内避光 4℃保存的板子亦可以使用。
操作方法:(以 EGY48-pLacZi 酵母单杂交体系为例)
1. 载体构建 pLacZi-X & pB42AD-Y;
2. 载体共转化 EGY48 酵母感受态细胞;
3. 转化产物涂布 SD/-Trp/-Ura with Agar 平板,28-30℃培养 3-5 天;
4. 阳性克隆检测(菌落 PCR);
5. 阳性菌落涂布 SD-Ura-Trp/x-gal 显色平板,28-30℃培养 3-5 天后观察显色反应。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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