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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
RAPA3G Probe qPCR MasterMix (with UDG)
- 保质期:
3年
- 供应商:
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件:
-20°C
- 规格:
1 ml /25 ml
| 规格: | 1 ml | 产品价格: | ¥500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 25 ml | 产品价格: | ¥7550.0 |
RAPA3G Probe qPCR MasterMix (with UDG)
描述:RAPA3G Probe qPCR MasterMix 将热启动 RAPA3G DNA 聚合酶、反应 Buffer、dNTP 染料等试剂预混在一起, 是一种 2×浓度的单组分预混试剂。该制品不含有 ROX 校正 染料,适用于各种荧光标记探针,并且适用于各种定量 PCR 机型。优化的反应缓冲液,使得该制品可用于单重及多重的 探针法定量 PCR。
制品中的 RAPA3G DNA 聚合酶为第三代 DNA 聚合酶, 其具有最高的杂质耐受性,其对乙醇、胍盐、肝素、血清、 植物多糖多酚具有极高的耐受性,因此可用于粗样品的直接 定量 PCR 检测(Direct PCR)。该酶经化学法修饰,在 50℃ 以下 100%无活性,只有 95 度条件下加热 5min 后才能完全 恢复酶的活力。因此该系统可以有效抑制非特异性 PCR 扩 增,极大的提高了 PCR 扩增特异性。
由于 RAPA3G DNA 聚合酶对 dUTP 具有极强的识别能 力,该制品中的 dTTP 核酸碱基完全被 dUTP 所取代,因此 扩增产物均包含 dUTP,在配合热敏 UDG(该酶在 95℃热 变性 5min 后不可逆失活,不影响后续 PCR 反应)的条件下 能达到最佳的防污染能力。在 10e5 copies 污染物的测试条 件下,Ct 推迟 15 个以上(污染去除能力>99.997%)。

包装

储存:-20℃可保存 2 年。短期使用可放置 2-8℃,保存 3 个 月。如出现白色沉淀溶解后使用,不影响反应性能。该试剂 经 30 次冻融后性能无下降,因此不使用时请置于-20℃避光 保存。


4. 反应结束后确认 Real-Time PCR 的扩增曲线和标准曲线。R Gre
注意:消化污染步骤中的温度设置可在 25-37℃之间均可,无显著差异,但高于 42℃以上的温度会导致热敏 UDG 消化能力急剧下降。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验。G. 反应体系的设置:A-G这五个步骤简单设置好,可以保存,修改反应程序或者立刻进行反应。需要注意一点ABI仪器需要加ROX参比染料,默认的是ROX。有些公司是把ROX或者其他染料配制在MasteMix里面;也有的是单独分开。要根据不同公司的MasterMix进行这一个步骤的选择。BioTeke的MasterMix里没有参比染料,所以选择“none”。设置好之后,就可以把配置好的PCR管放进仪器,点击RUN!Real-time qPCR数据分析1. Real-time qPCR常见参数基线
Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
尽量靠在上游引物; 长度 30-45 bp,Tm 比引物高至少 5 ℃; 5』端不要是 G,G 会有淬灭作用,影响定量 四、Real-time qPCR 操作过程 1. RNA 提取和反转录 在抽提 RNA 过程中任一环节的不正确操作都可能导致 RNA 酶的污染。由于 RNA 酶的活性很难完全抑制,预防其污染是十分必要的。在实际的操作中应遵循下面一些原则: 1. 全程佩戴一次性手套。皮肤经常带有细菌和霉菌,可能污染 RNA 的抽提并成为 RNA 酶的来源。培养良好
Real-time qPCR手册---手把手教你从菜鸟到高手
书上建议的程序。 G. 反应体系的设置: A-G这五个步骤简单设置好,可以保存,修改反应程序或者立刻进行反应。需要注意一点ABI仪器需要加ROX参比染料,默认的是ROX。有些公司是把ROX或者其他染料配制在MasteMix里面;也有的是单独分开。要根据不同公司的MasterMix进行这一个步骤的选择。BioTeke的MasterMix里没有参比染料,所以选择“none”。设置好之后,就可以把配置好的PCR管放进仪器,点击RUN!五、Real-time qPCR数据
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