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普健生物
- 服务名称:
XtenCHO高密度表达系统
服务简介
XtenCHOTM由Atagenix自主开发用于高效表达蛋白抗体高密度瞬转表达系统,该系统具有表达量高(一般为200-400mg/L,部分抗体的表达量高达1g/L),工艺简单,有利于高通量抗体表达。
服务优势
1.XtenCHOTM细胞是Atagenix开发的一种经基因改造的CHO细胞株,使用含配套元件的载体,可以使转染进入细胞的表达载体拷贝数增加,延长游离质粒在细胞内的停留时间,从而使载体携带的目的基因获得高水平,持续表达。
2.XtenCHOTM高密度瞬转表达系统改进了CHO常规转染方法,采用新颖的高密度转染方法和特殊的细胞培养模式,提高了转染后的细胞活率,使转染细胞存活时间从常规6-7天延长至10-14天,进一步提高了目的蛋白的产量。
3.XtenCHOTM高密度瞬转表达系统的转染试剂、表达培养基和补料培养基相较于常用的阳离子脂质体转染试剂、商业化CHO瞬转培养基以及补料培养基,成本大大降低,更适用于工业生产,在规模较大的重组蛋白瞬时表达生产中更能体现其性价比高的特点。
服务流程
服务内容
| 服务内容 | 客户提供 | 服务步骤 | 服务周期 | 交付内容 |
| 哺乳动物细胞表达系统 | 基因序列 载体 |
基因合成 | 2-4周 | |
| 表达式及纯化测试 | 2周 | 提供表达及纯化测试报告 决定是否进行下一步放大 |
||
| 1L表达及纯化 | 2周 | 提供蛋白样品及报告 | ||
| 摇瓶或发酵罐放大 | 2-4周 | 提供蛋白样品及报告 |
案例展示
1.与其它商业化表达系统的比较
使用XtenCHOTM高密度瞬转表达系统和其它公司的两个商业化CHO瞬转表达系统CHO Expression system1和CHO Expression system 2同时对一个抗体进行表达,转染后的细胞密度和活率监测及抗体产量见图1和图2:
图1 不同表达系统转染后细胞密度及活率监测
图2 不同表达系统表达相同抗体产量比较
2.不同治疗性重组抗体表达测试
选取4种典型的治疗性重组抗体序列,用 XtenCHOTM高密度瞬转表达系统进行表达测试。 抗体产量见图3:
图3 XtenCHOTM系统表达不同抗体的产量测定
Ab1: Pembrolizumad, Ab2: Utomilumab, Ab3: Trastuzumab, Ab4: Claudiximab
普健生物(武汉)科技有限公司于2012年在武汉成立,作为武汉国家生物产业基地指定的光谷抗体发现与筛选公共服务平台,具备优越的技术实力和国际化发展的战略格局,专注于重组蛋白、抗体、诊断原料、抗体药物发现等自主技术平台的建设和下游生物医药产品的战略合作。
公司大楼坐落于东湖新技术开发区神墩四路, 这里绿叶繁茂,道路宽敞,周围有一众生物科技型高新企业。普健生物作为一员加入此处,为周遭增添了一抹亮丽的色彩。
公司立足于生命科学领域,自主建立三大完善的技术服务平台:生命科学研究平台、诊断原料开发平台、抗体药物研发平台。生命科学平台:拥有五大成熟高效的蛋白表达系统(枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞),鼠/兔单克隆抗体平台,可提供蛋白表达、分子构建-蛋白表达纯化-结构解析、抗体重组表达、鼠/兔单克隆抗体制备以及相关检测服务。诊断原料开发平台:拥有开放式化学发光自动平台,可缩短研发周期、降低开发成本与技术风险,为广大客户提供各种诊断核心原料开发。抗体药物发现平台以杂交瘤筛选与噬菌体展示技术为主,目前已完成构建并对外提供抗体筛选技术服务的文库有:新冠特异性抗体噬菌体文库、羊驼天然纳米抗体噬菌体文库、兔源天然抗体噬菌体文库、小鼠天然抗体噬菌体文库。同时也开发了大量的重组蛋白、抗体、工具酶、药物对照抗体、工业酶、诊断原料等相关产品。
目前已拥有的自主技术包括:哺乳动物细胞重组蛋白表达系统、稳定细胞株构建、噬菌体文库的构建以及淘选、DNA免疫技术、化学发光免疫诊断抗体筛选技术等等。截止目前已成功交付数万例与重组蛋白、抗体相关的技术委托研发,客户以及合作伙伴涵盖了国内外优秀的学术研究机构以及制药公司;并且与FIND(创新诊断基金会)、BAYER(拜耳作物科学)、广州呼吸健康研究院建立合作关系;与青岛大学附属医院医学研究转化中心,苏州系统医学研究所,广州再生医学与健康广东省实验室建立战略合作关系。
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文献和实验- Antibodies to a Full-Length VAR2CSA Immunogen Are Broadly Strain-Transcendent but Do Not Cross-Inhibit Different Placental-Type Parasite Isolates
- "ОЦЕНКА IgG-ЗАВИСИМОГО ГУМОРАЛЬНОГО И КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА У ЛИЦ, ПЕРЕНЕСШИХ COVID-19, И У ЗДОРОВЫХ ДОБРОВОЛЬЦЕВ"
- ОПРЕДЕЛЕНИЕ УРОВНЯ НЕЙРОСПЕЦИФИЧЕСКИХ АУТОАНТИТЕЛ У БОЛЬНЫХ COVID-19: ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЕ СООБЩЕНИЕ
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先来看下传统重组蛋白表达系统: 传统重组蛋白表达系统应对的挑战: 操作流程长:5天-4周时间 很多蛋白不能在细胞内成功表达 不可以改造目标蛋白 以大肠杆菌为代表的原核蛋白表达系统是常用的表达系统,具有表达量高和成本低的优点,但是蛋白质翻译后缺乏加工机制(比如形成二硫键和蛋白糖基化等),且很难保留生物活性。 以甲醇毕赤酵母为代表的酵母蛋白表达系统,具有表达量高,可诱导,糖基化机制接近真核生物等优点,但是部分蛋白产品易降解,表达量不可控。 哺乳动物细胞和昆虫细胞表达系统
库。 克隆资源因为已克隆到Gateway改造过的载体,所以可以快速地将基因转到各种表达系统中。 图4 进入Gateway系统的各种路线 * 目前的克隆资源带有attB位点,需要与pDONR质粒重组五、触手可及的最高级表达系统 一旦您构建好Gateway入门克隆,蛋白表达和分析的大门就会向您敞开。使用Gateway技术,您可以进入到几乎是无数种的表达系统。因为没有一个单一的表达系统蛋白适合于每一种蛋白,优化基因表达的最好方法是在多个系统中分析您的蛋白(图5)。 图5 在Gateway
相关专题 Gateway技术提供以下可能: 通过去除冗长的亚克隆 步骤节省您的时间 同时将您的基因转移到多个表达系统 在任何您选择的系统――体外,细菌 ,酵母,昆虫,或哺乳动物――分析表达 一、一种更好的克隆 方法 Gateway技术能够克隆一个或多个基因进入到任何蛋白表达系统(图1)。这项强大的体外技术大大地简化了基因克隆和亚克隆的步骤,而同时典型的克隆效率高达95%或更高
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