Bst DNA Polymerase, Large Frag

产品名称：Bst DNA Polymerase, Large Fragment(with dNTP)
中文名称：Bst DNA聚合酶，大片段(with dNTP)

产品编号与包装规格：

编号	产品名称	规格	产品介绍	产品价格
HKE015-01B	Bst DNA Polymerase, Large Fragment(with dNTP)	800U×5	Bst DNA聚合酶，大片段	1075

 

产品描述：Bst DNA聚合酶大片段是Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的一部分，来源于E.coli菌株。利用基因重组技术，在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。该酶具有5′→3′DNA聚合酶活性， 但不具有5′→3′外切核酸酶活性。本制品可应用于DNA测序、DNA 标记和等温DNA扩增等。

产品特点：
      链置换活性强。
      高灵敏度。
      樶佳活性温度为 65℃，恒温扩增，无需热循环仪。

产品用途：
      1）富含 GC 序列的 DNA 序列测定；
      2）微量（纳克量）DNA 模板的快速测序；
      3）随机引物 DNA 标记；
      4）双链 DNA 5'突出端补平法标记；
      5）可用于等温 DNA 扩增，如环介导等温扩增（LAMP），全基因组扩增（WGA），解旋酶恒温基因扩增（HDA）等。

应用实例：图例）Bst DNA 聚合酶大片段用于LAMP 实验，以 M13 ssDNA 为模板， 以 F3/B3，FIP/BIP 为引物，65℃反应1 小时后，进行琼脂糖凝胶电泳检测。

泳道M：1kb DNA Ladder ；
泳道 1：LAMP 扩增产物。

反应体系（25μL）如下：

10×Bst LF Buffer	2.5μL
F3/B3	0.2μM（终浓度）
FIP/BIP	0.8μM（终浓度）
甜菜碱	1M（终浓度）
dNTPs	400μM（终浓度）
M13 ssDNA 模板	2μL
Bst DNA 聚合酶Large Fragment	1μL（8U）
ddH2O	至 25μL

 

保存温度：-20℃。

产品包装（A 包装）：

质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE 胶检测仅可见清晰单一的目的条带，qPCR 方法检测无大肠杆菌 DNA 残留，无核酸内、外切酶污染。

活性定义：65℃条件下，30分钟内使10nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。

10×反应缓冲夜：200mM Tris-HCl，100mM (NH4)2SO4，500mM KCl，20mM MgSO4，1% Tween 20，pH8.8。

保存体系：50 mM KCl，10 mM Tris-HCl (pH 7.5)，1mM DTT, 0.1 mM EDTA，0.1% Triton X-100 和 50% Gly1cerol。

反应条件：1×反应缓冲夜，65℃温浴。

热失活：80℃，10 分钟。

注意事项：
      1）Bst DNA 聚合酶不具有 3′→5′外切酶活性；
      2）长期贮存需加入 100μg/mL BSA 或 0.1% Triton X-100；
      3）建议反应温度不要超过 70℃；
      4）Bst DNA 聚合酶不能用于热循环测序或PCR。