12411 150mm细胞培养皿（易握型）

蛋白质印迹（Western blot）实验方案

蛋白质印迹流程点击下载：蛋白质印迹实验方案溶液和试剂●裂解缓冲液这些缓冲液可在 4 ℃ 下保存数周，或者以分装形式在 -20 ℃ 下保存长达 1 年。Nonidet-P40 (NP40) 缓冲液150 mM NaCl1.0% NP40（可用 0.1% Triton X-100 替代）50 mM Tris-HCl pH 8.0蛋白酶抑制剂RIPA 缓冲液（放射免疫沉淀试验缓冲液）150 mM NaCl1.0% NP-40 或 0.1% Triton X-1000.5% 脱氧胆酸钠0.1% SDS

类器官培养与应用——肾类器官

，加入 150μl 分枝形成培养基。下层培养基为无 Matrigel 的分枝形成培养基。 图 2. 光镜下 UB 分枝形态，比例尺， 200 μm【3】   三、肾单位前体细胞（Nephron progenitors, NP）谱系诱导 5-2、将步骤 4 中的 iPSCs 转移至 V 型底低吸附的 96 孔板中，当细胞/克隆团达到 10,000 个时，用 NP 培养基换液，细胞将重新聚合成 EB。 6-2、培养 24h 后，将 EB 转移到 U 型底低吸附的 96 孔板中，加入中胚层诱导

交联染色质免疫共沉淀（X-ChIP）实验设计

。加入甘氨酸可以消除甲醛使交联反应终止。1.1.准备两个长满细胞的150cm2的细胞培养皿（1*107-5*107 个细胞/皿）。将甲醛直接滴入PBS洗过的细胞培养皿中，使其终浓度为0.75%，然后在室温缓慢旋转10分钟，使蛋白和DNA发生交联。1.2 加入甘氨酸使其终浓度为125mM,在室温晃动孵育5分钟。1.3 使用10ml预冷PBS清洗细胞2次1.4 使用细胞刮将细胞收获放入 5ml 预冷PBS中，并转入50ml的管子。1.5.在皿里加入3mlPBS，将剩余的细胞转移到50ml管子里1000g