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胰酶是用来消化贴壁细胞,使其从培养瓶表面脱落以便传代的溶液,在贴壁细胞培养中
是必不可缺的试剂。主要成分为胰蛋白酶、氯化钠、绿化钾、EDTA、水等,尚恩生物配
置的胰酶溶液具有活性高、保存时间长等优点,适合大部分细胞系及部分原代细胞传代
使用。
产品详情:
| 产品名称 | 0.25%胰酶(含EDTA) |
| 货号 | SNT-002 |
| 规格 | 100ml |
| 简介 | 胰酶是用来消化贴壁细胞,使其从培养瓶表面脱落以便传代的溶液,在贴壁细胞培养中是必不可缺的试剂。主要成分为胰蛋白酶、氯化钠、绿化钾、EDTA、水等,尚恩生物配置的胰酶溶液具有活性高、保存时间长等优点,适合大部分细胞系及部分原代细胞传代使用。 |
| 浓度 | 1x (即用型,无需稀释) |
| 外观 | 无色透明液体 |
| 成分 | NaCl:8g/L KCl:0.2g/L KH2PO4:0.27g/L Na2HPO4:1.44g/L 猪胰酶:2.5g/L EDTA:0.2g/L |
| pH | 7.0-8.0 |
| 储存条件 | 2-8℃(6个月内);-20℃(长期) |
| 保质期 | 2-8℃(6个月内);-20℃(2年) |
注意事项:
1.该产品经过2道0.22um无菌过滤,经检测无菌、无其他污染。使用时应注意无菌操作,避免污染。
2.保存时间比较长时,应注意拧紧瓶口并封好封口膜,避免水分蒸发过多影响缓冲液pH及渗透压。
3.不同细胞消化时间差别很大,注意控制消化时间,避免消化过度导致细胞状态变差。
4.胰酶溶液具有生物活性,戴手套操作,若不慎滴在皮肤上,及时用清水冲洗干净。
5.该产品仅供科研使用,不得用于诊断或临床实验。
武汉尚恩生物技术有限公司专注于细胞产品的研究、生产、销售和服务,公司坐落于武汉
东湖高新区光谷生物城,已整体通过ISO 9001:2015质量管理体系,获得国家高新企业、
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和运营团队;已完成从细胞辅助器材、细胞产品到细胞相关专业化服务的全细胞产业链发
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胞系、原代细胞、胎牛血清、辅助试剂、基础培养基、完全培养基、无血清培养基、无血
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文献和实验和 p53 的低水平表达。培养液:MEM(含 2 mM L - 谷氨酰胺和 Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸,1.0 mM 丙酮酸钠), 10% 胎牛血清传代:吸去培养液。用 0.25%(w/v)Trypsin- 0.53 mM EDTA 洗一次,以去除血清(血清会抑制胰酶活性)。加 2 - 3 毫升 Trypein-EDTA,放 37℃ 培养箱内约 5 分钟,直到细胞全部脱落。加 6 - 8 毫升培养液,用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中
易造成细胞膜损伤而出现细胞坏死的假阳性,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-荧光素的结合从而干扰对于细胞凋亡的检测。同时,胰酶细胞消化液中应尽量不含EDTA,因为EDTA可能会影响Annexin V与磷脂酰丝氨酸的结合。 加入步骤1中收集的细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻悬浮细胞并计数。 注意:加入细胞培养液非常重要,一方面可以收集已经悬浮的发生凋亡或坏死的细胞,另一方面细胞培养液中的血清
) Propidium Iodide Staining Solution(51-66211E) 三、实验步骤贴壁细胞需用0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时,注意必须彻底清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding
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