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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
杭州昊鑫生物科技股份有限公司
- 库存:
充足
- 英文名:
Cell Culture Freezing Medium
- 规格:
100ml
浙江省总代理 杭州昊鑫生物科技股份有限公司


【产品概述】
本产品主要成分是培养基、优质胎牛血清及DMSO等,经过滤除菌,可直接用于细胞保存。
【使用方法】
1、细胞冻存
(1)常规收集贴壁细胞或悬浮细胞至15ml无菌离心管;
(2)100-200g,离心5-10分钟,弃上清;
(3)计算出细胞总数和所需细胞冻存液的量。细胞的冻存密度一般为5×105~1×107cells/ml;
(4)加入适量细胞冻存液,用移液枪轻轻吹打以重悬细胞,分装于1.5ml或2ml细胞冻存管中,并做好标识;
(5)将细胞冻存管放置于可逐步降低温度的装置如程序性冻存盒内并放置在-80ºC冰箱内,确保冷却速度约为1ºC/min。通常冷却速度不宜快于0.5ºC/min;
(6)短期保存可放置在-80ºC冰箱内,若长期保存应转移至液氮中保存。
2、细胞复苏
(1)从液氮中取出冻存管,迅速置于37ºC水浴锅内,轻轻晃动(1分钟内),直至完全融化;
(2)将细胞悬液转移至15ml无菌离心管中,加入约5-10ml预热的完全培养基,轻轻混匀;对于一些复苏效率很高的细胞也可直接将细胞悬液转移至离心管进行下一步骤的离心;
(3)100-200g,离心5-10分钟;
(4)确保细胞沉积于管底后,小心弃掉上清;
(5)加入适量预热的完全培养基,轻轻吹匀后转移至培养器皿中,放入细胞培养箱中培养。
【注意事项】
1、本产品需注意无菌操作,避免溶液被微生物污染;
2、请确保冻存前细胞生长情况良好,例如处于对数生长期的细胞,并且冻存时存活率大于90%;
3、建议细胞冻存在液氮中,可以长时间进行保存。如果置于-80ºC保存,保存时间大约为1年;
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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文献和实验液界 liquid junction 指二种浓度或不同组成的电解质的接触面。液界可简单地把比重轻的溶液由重叠在重液之上而形成,但随着时间的进行,由于扩散或对流等可多少出现液体的混合。为防止混合可采取放置多孔质的膜以延缓扩散,或不断流动液体更新液界等方法。在液界上可产生液界电位( liquid junction potential, EL )。比较简单的是在浓度不同的同一种一价的电解质溶液间或浓度相同并且具有共同的离子的不同的电解质溶液间的情况下,液界电位的大小与液界的混合
在园子里经常看到询问冻存、复苏细胞的方法和注意事项。故介绍一些致命的 “败笔”,和解决方法。 希望对大家有帮助。 ( 以 Raji 为例) 一、细胞冻存: 1. 错误的时机: 细胞状态不好(长的太过了,培养液已经很黄;细胞可疑污染;细胞已 经开始凋亡或崩解;连续培养超过二个月,细胞性状已有改变改变)。 解决: 最佳时机:细胞增殖旺盛,情况稳定,试验效果良好,复苏后两周内。 2. 细胞太少: 冻存时细胞浓度低于 1-5×1000,000/ml。(复苏很难成功)。 解决: 离心后调整细胞
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