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环凯微生物 HKE047-01
企业认证
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Plus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (gDNA Purge)
ISO9001
有效期见于产品标签
环凯微生物
贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖
100次/盒(20μl体系)
产品名称:一体式第一链cDNA超级预混液(去除gDNA)英文名称:Plus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (gDNA Purge)
产品编号与包装规格:
产品描述:第一链cDNA合成预混液是以mRNA或者总RNA为模板,高效 合成第一链cDNA。本产品含有反转录反应所需的全部试剂 (II Reverse Transcriptase,RNase Inhibitor,Oligo(dT)18,Random N6,dNTPs)。反应时只需要加入RNA模板和水即可,操作简单,降 低操作过程中的污染。本制品含有去基因组成分gDNA Purge,以 RNA为模板进行cDNA第一链合成时,可以同步去除基因组DNA污 染,反应结束后,75℃加热5分钟,就可以失活反转录酶,RNA酶 抑制剂。合成的第一链cDNA能直接用于PCR 或荧光定量PCR的模 板,第二链cDNA的合成或线性RNA扩增,也可用于需要用带有 放射性或非放射性核苷酸标记第一链cDNA的实验。
产品特点: 本制品采用耐高温逆转录酶,大幅提高热稳定性和 cDNA 合 成效率; 本制品中添加的II Reverse Transcriptase 无 RNase H 活性,可 避免第一链 cDNA 合成过程中,RNA/DNA 杂交模板链中 RNA 降解,保证 cDNA 合成的质量; 本制品中 Random N6 和 Oligo(dT)18 引物比例经过优化,可均 匀合成样品中的 cDNA; 本制品中含有去基因组成分,反转录时可同步去除基因组 DNA 污染。
保存温度:-20℃。
产品包装:
注意事项: 1)用DEPC 处理实验用到的所有实验器材,或者 购买已经证明无核酸酶的实验用具,实验过程戴 手套并经常更换手套,避免 RNA 酶的污染。 2)确保所用试剂中无 RNA 酶污染。 3) 试剂盒要严格密封保存。在反转录过程中,所 有管子要确保扣严。 4) 纯化过的RNA 必须保证不含有盐,金属离子, 乙醇和本酚,以上成分会干扰第一链 cDNA 的合 成反应。可采用乙醇沉淀RNA 的方法去除掉痕量 污染物。 5) 为保证反转录反应的有效进行,需使用高质量 的RNA 模板。 6) 实验结果显示,最快逆转录速度可达2kb/min, 需要提高反转录效率或模板含量较低时可以适当 延长反转录时间。
操作方法与常用PCR 循环:
注意:当 RNA 浓度较高或目标基因属高拷贝基因时,可将去基因组 和逆转录合为一步操作,更省时省力。所有组分加到一起,50℃孵 育15-30min,最后75℃孵育5min 终止反应即可。
客户应用实例与本试剂盒在 37℃条件下保存的稳定性验证:
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