Transfection-ready Cas9 SmartN

mRNA富集还是rRNA去除

化到相似的浓度水平。最后，剩余的 cDNA 分子在 PCR 反应中被扩增以生成可测序的文库（图 2）。   图2 | 使用双链特异性核酸酶 (DSN) 处理酶法去除丰富的序列。 DSN 处理应用广泛，特别是用于注释的测序流程，DSN处理被普遍使用。它可用于从特征较少的物种中获取转录组信息，这些物种无法使用使特定探针进行靶向去除高丰度转录本的方法，以及不具有 poly(A) 尾而无法通过 poly(A) 选择富集 mRNA 的物种(3) . 因此，一些 RNA-Seq 试剂盒及常用的去除方法

RNAi技术专题之：体外转录合成双链RNA

选择是RNAi实验成败的关键。哺乳动物细胞RNAi实验中，使用最广泛且最有效的是21bp siRNA。siRNA由正义链和反义链组成，两条链3’端均有2个碱基突出，一般为UU或dTdT，其中正义链的前19nt与靶基因序列相同。1. siRNA设计的原则SiRNA双链设计时，一般在靶mRNA起始密码下游100—200bp至翻译终止密码上游d0—100bp的范围内搜寻AA序列，并记录每个AA3’端相邻19个核苷酸作为候选si.RNA靶位点。其中AA（N19）TT是最理想的序列，若靶mRNA中无此序列，亦可

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Dynabeads Oligo(dT)25 及mRNA分离试剂盒 Dynabeads　Oligo(dT)25是一种直径为2.8μm的均一、超顺磁的微球体，其表面的5连接键共价结合了由25个脱氧核糖核苷组成的长链。Dynabeads Oligo(dT)25是为从真核总RNA中或直接从动物组织、细胞和植物的粗提物中快速分离出高纯度、全长的polyA-RNA而设计的，可在15分钟内直接分离得到全长、纯的mRNA溶液，无需经过任何的纯化步骤。经Dynabeads Oligo(dT)25分离得到的mRNA溶于适宜的缓冲