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Recombinant Pla
企业认证
Recombinant Plasmid Miniprep Kit
50ci
目录号:DK001-01A
产品描述:
本试剂盒通过碱裂解法裂解细胞,新型的硅基质膜专一结合DNA,在特定条件下,有效去除内毒素、基因组DNA、RNA、蛋白质等杂质。每次可抽提1~4ml菌液,抽提获得的质粒量会受质粒拷贝数,细胞培养浓度等因素影响。由本试剂盒所得的质粒可直接用于细胞转染,DNA测序,PCR,基于PCR的突变,体外转录,转化细菌,内切酶消化等下游实验。
产品用途:
用于要求保真度高的PCR反应,包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成、DNA片段的补平等。
使用建议:
如果所提质粒为低拷贝质粒或大10kb的大质粒,应加大菌体使用量,使用5~10ml过夜培养物,同时按照比例增加P1、P2、P3的用量,洗脱缓冲液EB应在65~70℃水浴预热,在吸附和洗脱时可以适当的延长时间,以增加提取效率。其它步骤相同。
注意事项:
1.溶液 P1(Buffer P1) 在使用前先加入RNase A(全部加入),混匀,4℃保存。
2. 漂洗液PW(Buffer PW)使用前应加入48ml 无水乙醇。
3. 溶液 P2(Buffer P2)低于室温会产生沉淀,使用前应检查是否出现浑浊,如有浑浊现象,50℃水浴加热溶解。溶液 P2(Buffer P2)使用后请拧紧瓶盖。
4. 溶液P2和P3对人体有刺激性,操作时请小心,不要直接接触。
5. 提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。
6. 去蛋白液PE可以有效去除残留的蛋白污染, 当宿主菌为endA+ (TG1、BL21、HB101、ET12567、JM系列)等核酸酶含量较高的菌株时,强烈推荐使用去蛋白液PE。
保存温度:
该试剂盒在室温条件下,可保存12个月,更长时间保存可置于4℃。若溶液产生沉淀,可在室温下放置一段时间,或在37℃水浴中预热10min,以溶解沉淀。
参考文献:
The interactions between gut microbiota and entomopathogenic fungi: a potential approach for biological control of Blattella germanica (L.)[J]. Fan Zhang et al. Pest Management Science. 2017.
For research use only.
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