高通量ChIP-IT®试剂盒提供了一个优化的方案和所有需要的试剂,从24个细胞或组织样本中进行转录因子的组蛋白修饰的ChIP检测,产生qPCR或下一代测序就绪的样本,比传统方法的操作时间少得多。
该试剂盒设计用于使用PIXUL™多样品声纳仪剪切的染色质,以提供一个强大的、简化的工作流程,并尽可能有效地处理多个样品。
该试剂盒也适用于用其他方法制备的染色质样品。只需用试剂盒中提供的5X ChIP缓冲液稀释你的样品,就可以进行高通量ChIP-IT®处理。
高通量ChIP-IT®试剂盒的优势优化的方案和试剂确保高效的结果
相对于传统的ChIP方案,简化的工作流程减少了总时间和操作时间
染色质输入要求低,组蛋白ChIP需要70纳克(10,000个细胞当量),转录因子ChIP需要333纳克(50,000个细胞)。
优化的反向交联步骤,仅需2小时
高通量ChIP-IT®试剂盒内容该试剂盒包含足够的试剂用于24个ChIP反应。该试剂盒中的试剂有多种储存温度。请相应地储存组件。所有试剂在正确储存的情况下,保证自收到之日起6个月内稳定。请勿重新冷冻蛋白G磁珠。
蛋白质G磁珠;储存于4°C
TE,pH8.0;储存于RT
蛋白酶抑制剂鸡尾酒;储存于-20°C
阻断剂AM1;储存于-20°C
BSA (10 mg/mL); 储存于-20°C
5X ChIP 缓冲液;储存于 RT
ChIP缓冲液;储存于RT
阻断剂;储存于-20°C
洗涤缓冲液AM1;储存于RT
氯化锂缓冲液;储存于RT
洗脱缓冲液AM4; 储存于RT
蛋白酶K(10 µg/µL);储存于-20°C
RNase A (10 µg/µL); 储存于-20°C
低EDTA TE;储存于RT
SPRI珠;储存于4°C
条形磁铁和胶点;储存于RT
高通量ChIP-IT®试剂盒数据
图1:使用高通量ChIP-IT®试剂盒在Beckman Coulter Biomek i7自动工作站上进行自动染色质免疫沉淀(ChIP),用4µg AbFlex® H3K4me3抗体(Cat.No.91264)免疫沉淀来自MM1S和KMS11多发性骨髓瘤细胞系的30µg PIXUL™多样品声纳器生成的染色质。ChIP DNA在Illumina® NextSeq® 500仪器上进行测序,并对序列标签进行映射,以确定组蛋白H3K4me3结合位点。这里显示了19号染色体的一个区域(56,000,000:56,600,000),显示了3个KMS11特异性H3K4me3峰。顶行,MM1S;中行,KMS11;底行,汇集的输入。

图2:使用高通量ChIP-IT®试剂盒,用PIXUL™多样本超声仪超声处理4.8μg的K562染色质,并使用组蛋白H3K4me3和组蛋白H3K27ac抗体进行ChIP反应。用GAPDH的引物(条形图的深色部分)和未翻译的阴性对照基因组位点(条形图的浅色部分)的qPCR分析来自ChIP反应和输入的纯化DNA。

Active Motif公司是一家致力于研发和生产核细胞分子生物学和表观遗传学研究用试剂的专业公司,也是世界著名的转录因子试剂生产商和CHIP-seq外包服务供应商。
Active Motif的产品涉及:表观遗传学相关抗体、Chip级别抗体、重组识别子和催化酶、预甲基化修饰的重组组蛋白、多聚核小体和生物素标记核小体;以及各类染色质分析、转录因子表达调控分析和DNA甲基化分析的试剂盒等。
产品详情欢迎点击链接进入官方网站查询。
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