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- 2026年03月26日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 库存：
100
- 样本：
血清、血浆、组织液等液体样本
- 标记物：
hrp辣根过氧化物酶
- 适应物种：
牛
- 应用：
科研
- 检测方法：
酶联免疫法
- 检测范围：
详询
- 规格：
96T/48T
【产品名称】
通用名：牛口蹄疫病毒A型抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名：Test Kit for Antibodies to Bovine Foot and Mouth Disease Virus A （ELISA）
【包装规格】 96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒
相关图片（一）：
【预期用途】 口蹄疫是由口蹄疫病毒（Foot and Mouth Disease Virus，FMDV）引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病，其特征为口腔黏膜、蹄部、乳房皮肤发生水泡和烂斑。
本试剂用于检测牛血清中口蹄疫病毒A型抗体，可用于口蹄疫病毒A型疫苗免疫效果评价。
【原 理】
本试剂盒由预包被口蹄疫病毒A型抗原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（ELISA）原理检测牛血清样本中口蹄疫病毒A型抗体。实验时在酶标板中加入待检样本和抗体工作液，经温育后洗涤除去未结合的其他成分后；再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加TMB底物液，若样品中含有口蹄疫病毒A型抗体则将阻断抗体工作液与酶标板上抗原结合，从而使后续反应不出现显色；反之则出现显色；显色深浅与样品中的特异性抗体含量成负相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值， 即可知样品是否含有口蹄疫病毒A型抗体。
【试剂盒组成】
| 序号 | 名称 | 规格/96T×1 | 规格/96T×2 | 规格/96T×5 |
| 1 | 酶标记物 | 11ml×1(红盖) | 11ml×2(红盖) | 26ml×2(红盖) |
| 2 | 抗体工作液 | 6ml×1(蓝盖) | 11ml×1(蓝盖) | 26ml×1(蓝盖) |
| 3 | 20X浓缩洗涤液 | 40ml×1(白盖) | 40ml×1(白盖) | 200ml×1(白盖) |
| 4 | 底物液A | 6ml×1(白盖) | 11ml×1(白盖) | 26ml×1(白盖) |
| 5 | 底物液B | 6ml×1(黑盖) | 11ml×1(棕盖) | 26ml×1(黑盖) |
| 6 | 终止液 | 6ml×1(黄盖) | 11ml×1(黄盖) | 26ml×1(黄盖) |
| 7 | 阳性对照 | 1.0 ml×1(红盖) | 1.5 ml×1(红盖) | 2.0 ml×1(红盖) |
| 8 | 阴性对照 | 1.0 ml×1(绿盖) | 1.5 ml×1(绿盖) | 2.0 ml×1(绿盖) |
| 9 | 酶标板 | 96T×1 | 96T×2 | 96T×5 |
| 10 | 盖板膜 | 1 | 2 | 5 |
| 11 | 自封袋 | 1 | 1 | 2 |
| 12 | 说明书 | 1 | 1 | 1 |
【储存及有效期】 2～8℃保存，有效期12个月。
包被板开封后请于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限为2个月。
【适用仪器】 含450nm、630nm波长的酶标仪，37℃恒温设备，可调微量移液器。
相关图片（二）：
【样品准备】
1.取动物全血按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品1周内可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。
2.待检血清样本恢复室温、混匀待用。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释成工作洗涤液(如19份蒸馏水或去离子水+1份浓缩洗涤液)。
【检验方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条，设阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3.阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照50μl；样品孔每孔先加入45μl工作洗涤液,再加入5μl血清样本（稀释比例为1:10）。
4.每孔加抗体工作液50μl，混匀，盖好盖板膜，置37℃（推荐水浴）避光反应30分钟。
5.甩去孔内液体，每孔加350 ul工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，最后一次拍干。
6.每孔加酶标记物100μl，盖好盖板膜，置37℃避光反应30分钟。
7.洗涤，同步骤5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，盖好盖板膜，置37℃避光反应15分钟。
9.每孔加终止液50μl，混匀，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值）。
【参考值】 实验正常的情况下，阴性对照吸光值≥0.8，阳性对照吸光值≤阴性对照吸光值×50%。
【检验结果的解释】
1.PI（阻断率）=（1-样本值/阴性对照孔均值）×100%，PI≥50%为阳性；PI＜50%为阴性。
2.本实验结果为阴性时表明抗体水平不足，建议补打相应疫苗。
相关图片（三）：
【试验方法的局限性】
该试验仅作为定性检测牛血清中口蹄疫病毒A型抗体，根据PI值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。
【注意事项】
1.实验操作时需戴手套、穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度，各种实验废弃物都应按传染物处理。
2.终止液具有腐蚀性，应避免接触皮肤和衣物，如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋，未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。
4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶，使用时需恢复至室温以完全溶解。
5.洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。
6.用于检测的样品应保持新鲜。
7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
8.不同批号试剂组分不得混用。
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文献和实验牛口蹄疫病毒（ FMDV ） 酶联免疫分析（ELISA ） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于检测牛血清，血浆中口蹄疫病毒（FMDV ）水平，感染牛的血液学诊断。 实验原理： 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法（ ELISA ）测定标本中牛口蹄疫病毒（ FMDV ）。用纯化的牛口蹄疫病毒（ FMDV ） 抗体 包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中口蹄疫病毒（ FMDV ） 相结合
疯牛病的牛只经过焚化处理，灰烬仍然有疯牛病毒，把灰烬倒在堆田区，病毒就可能会因此而散播。 目前，对于这种毒蛋白究竟通过何种方式在牲畜中传播，又是通过何种途径传染给人类，研究的还不清楚，迄今为止这种病毒还没有确切的命名。 口蹄疫病毒（Foot-and-mouth Disease Virus，FMDV） （一） 口蹄疫 口蹄疫是由口蹄疫病毒感染引起的偶蹄动物共患的急性、热性、接触性传染病，最易感染的动物是黄牛、水牛、猪
因代表种口蹄疫病毒引起口疮而得名。直径23～25纳米，氯化铯浮力密度1.43～1.45，RNA含量31.5％，不耐酸。 口蹄疫病毒 病毒抗原性易变异。已发现A、O、C、Asia I、SAT1 、SAT2 、SAT37个正型和60多个亚型。能自然感染偶蹄动物，以牛、猪最为易感。人也可被感染，但症状轻。病毒对初生幼畜感染性强，有些毒株对牛致病力强而对猪致病力弱，有些毒株则相反。1981年，用基因工程技术已培育出带有口蹄疫免疫原性蛋白基因的细菌，将用于制造疫苗。
