手机验证
询价列表
暂时没有已询价产品
微信扫一扫分享
分享到新浪微博
分享到丁香园论坛
2×Pfu Master Mi
企业认证
2×Pfu Master Mix(Quick Load)
1ml
目录号:E006-02A
产品描述:
本制品是将PCR反应所需的Pfu酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液以及优化剂和稳定剂,预先配制成2倍浓度的混合物。2×Pfu Master Mix专为扩增克隆DNA片段优化,高保真,错误率仅为1.3×10-6。使用时只需要加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,非常方便。
产品特点:
高保真:Pfu DNA聚合酶是使用最广泛的高保真酶,其保真度为普通Taq酶的10倍。
灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段(图例一)。
快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。
产品用途:
用于要求保真度比较高的PCR反应,包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成等。
使用建议:
Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平末端,无3´端"A"突出,除使用NovoRec® PCR一步定向克隆试剂盒(Cat. No: NR005)外,其它PCR产物的克隆方案有:
1)PCR前引物进行5´端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平末端的载体中。
2)将产物3´末端加A后再与T载体连接。
3)由于Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3´端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度,理想的引物长度为20~30mers。另外为了减少由3´→5´外切酶活性引起的引物降解,尽量在冰上配制反应体系。
保存温度:
-20℃
注意事项:
1)需要溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。
2)应根据实验目的选择合适的循环数,循环数过少,会造成扩增量不足。循环数过多,扩增量增加,但突变率会增加,并造成非特异性扩增。
3)根据引物Tm值设置合适的退火温度,退火温度过低,会造成非特性扩增。退火温度过高,可能扩增不到目的条带。
应用实例:
图例一)50μl 扩增体系中,分别以50ng~0.05ng人基因组DNA模板,对特定基因片段进行扩增。
泳道1:50ng;泳道2:5ng;
泳道3:0.5ng;泳道4:0.05ng;
泳道M:DNA Ladder 2000。
参考文献:
FIRST MOLECULAR EVIDENCE OF CERATOMYXA EPINEPHELA (MYXOZOA: CERATOMYXIDAE) AND ITS GENETIC VARIATION FROM DIFFERENT HOST SPECIES[J]. Yan-Mei HUANG. et al. ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA. 2021.
For research use only.
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
马上登录 或注册,即可保存询价历史