伴刀豆蛋白A(ConA)磁珠

产品描述

伴刀豆球蛋白A（ConA）磁珠是 粒径为200 nm 的纳米磁珠表面上共价结合了大量的伴刀豆球蛋白A（ConA）纳米级磁珠提供的超大比表面积，具有更多的结合位点，磁珠使用量更少，非特异性吸附率低。用于分离细胞或从血清和细胞提取物中分离糖蛋白，并可以借助磁力架等磁分离设备非常便捷地应用于分离糖蛋白，CUT&RUN CUT&Tag 等相关实验。

订购信息

产品名称	货号	规格
伴刀豆蛋白A(ConA)磁珠	AP62L222	1 mL

运输与保存

蓝冰运输。4℃保存，有效期12个月。注：避免冻融或离心磁珠。

技术参数

基质	硅基磁珠
配体	伴刀豆球蛋白A（ConA）
粒径	200nm
磁珠浓度	10mg/mL
结合能力	≥0.9mg 糖蛋白/mL磁珠
适用范围	分离糖蛋白，CUT&RUN，CUT&Tag

使用方法

自备试剂

缓冲液	配方
结合缓冲液	1×PBS, 1mM MgCl2,   1mM MnCl2, 1mM CaCl2 (pH7.4)
洗涤缓冲液	1×PBS, 1mM MgCl2,   1mM MnCl2, 1mM CaCl2 (pH7.4), 0.1% Tween 20
洗脱缓冲液	5mM Tris(pH   8.0), 0.15M NaCl, 0.05% SDS，1M Glucose

1.样本处理

(1) 准备哺乳动物细胞(1.0×104~1.0×105个)，离心收集(4℃，600×g，3-5min)，小心吸弃上清；

(2) 加入 500 μL 结合缓冲液，充分混匀重悬细胞，离心收集(4℃，600×g，3-5min)，小心吸弃上清；

(3) 加入 200-500 μL结合缓冲液，同时加入蛋白酶抑制剂，充分混匀，重悬细胞。

2.磁珠预处理

(4) 用移液器轻柔吹打伴刀豆球蛋白A磁珠 ，使其充分混匀，取10 µL磁珠悬液（可酌情调整磁珠用量）置于新的 1.5 mL离心管中，接着在磁力架上静置 1 min，待磁珠吸附到离心管侧壁上后，吸弃上清；

(5) 加入 500μL 结合缓冲液 ，用移液器轻柔吹打重悬磁珠，接着在磁力架上静置 1 min，待磁珠吸附到离心管侧壁上后，吸弃上清；

(6) 重复上个步骤(5)一次，注：面对多个样品时，可先将总共所需的磁珠预处理后再分装到各个反应管中。

3.样品的结合

(7) 在预处理后的磁珠中加入步骤3处理后的细胞样本混合，置于旋转混合仪上孵育（常温30min），接着在磁力架上静置 1min，待磁珠吸附到离心管侧壁上后，小心吸弃上清，离心管中剩余的即为蛋白-磁珠复合物；

4.洗涤

(8) 在步骤(7)得到的蛋白-磁珠复合物中加入500 μL洗涤缓冲液，用移液器轻柔吹打磁珠，并置于旋转混匀仪上孵育5min，接着在磁力架上静置1min，待磁珠吸附到离心管侧壁上后，吸弃上清。再重复此步骤两次；

5.蛋白洗脱

(9) 在步骤(8)得到的蛋白-磁珠复合物中加入50~250 μL洗脱缓冲液，置于翻转混合仪上孵育（常温10-30 min），接着在磁力架上静置 1 min，待磁珠吸附到离心管侧壁上后，收集上清，即为目的蛋白。收集上清，即为目的蛋白。若洗脱效果不佳，可重复洗脱一次，或者增加孵育时间。

注意事项

1.   本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。

2.   请勿高速离心、干燥或冷冻磁珠，这些操作会导致磁珠聚集而降低结合能力。

3.   避免使用含有 EDTA 或其它金属螯合剂的试剂，否则会降低磁珠与蛋白的结合效率 。

4.   磁珠使用前应充分振荡均匀。磁珠应保存在储存溶液中，防止干燥。

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本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。