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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
12个月
- 库存:
50
- 规格:
100ml
产品名称:结晶紫甲醇溶液(2.5%)
规格:100ml
用途:
注意事项:主要由结晶紫和无水甲醇组成,稀释20倍后使用。
储存条件:室温
备注:本产品仅供科研实验使用,未经允许不得用于其他目的!
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文献和实验孔 6 个, 3 个阳性对照孔各加 0.1ml 含 4 μ g TNF 的 RPMI-1640 培养液, 3 个阴性对照孔各加 100 μ l RPMI-1640 培养液。继续培养 18 ~ 24 小时。 3. 甩去培养液,用 PBS 小心洗涤一次,每孔加 0.1ml 10 %甲醇溶液固定细胞 30 秒钟。 4. 吸去甲醇溶液,每孔加 0.1ml 结晶紫染液,室温中放置 20 分钟。 5. 轻轻甩去染色液,用蒸馏水洗涤各孔,将培养板倒置于吸水纸上吸干水分。自然干燥或 37 ℃烘干
TNF的RPMI-1640培养液,3个阴性对照孔各加100μl RPMI-1640培养液。继续培养18~24小时。 3.甩去培养液,用PBS 小心洗涤一次,每孔加0.1ml 10%甲醇溶液固定细胞30秒钟。 4.吸去甲醇溶液,每孔加0.1ml结晶紫染液,室温中放置20分钟。 5.轻轻甩去染色液,用蒸馏水洗涤各孔,将培养板倒置于吸水纸上吸干水分。自然干燥或37℃烘干。此板可以在室温中长期保存。 6.测定前,每孔加0.1ml 33%醋酸脱色,充分振荡后在570
~100倍。利用染料结晶紫或MTT可使活细胞染色,再用脱色液将染料脱出,测定其OD值,即可反应细胞的存活状态或TNF对L929细胞的杀伤率,通过计算细胞死亡率,并与sTNF标准品对照,即可检测待测样品sTNF活性单位。 二、材料和试剂 1. L929细胞株(存活率应>95%) 2. TNF标准品:作倍比稀释(100 U/ml~0.1 U/ml)。 3. 待测样品:作倍比稀释至少6个不同稀释度。 4. 0.25%胰蛋白酶 5. RPMI-1640培养液及PBS
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