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浅析染色质免疫沉淀（ChIP）技术在 DNA 与蛋白质相互作用研究中的重要性

，从而调控 FGF2 下游信号通路。这就解释了 FGF2 在该信号通路中的主导作用。另一种常见的分子机制研究则是关注于 DNA 结合位点下游的基因，用此类基因的表达活化或抑制来解释表型上的差异。例如，Seo 等人 [26] 采用 ChIP 技术分析了 NeuroD 结合位点的下游基因，发现了多个转录调控因子，因此得出结论，NeuroD 则位于该神经发育调控网络的重要位置。 其次，ChIP 也往往被用来验证其他 DNA-蛋白质相互作用研究方法所得的结果。由于其他研究方法并非在体内(in vivo)实现

浅析染色质免疫沉淀（ChIP）技术在DNA与蛋白质相互作用研究中的重要性

染色质免疫沉淀（ChIP）是研究蛋白质-DNA相互作用的一项强大技术，广泛用于多个领域的染色质相关蛋白的研究（如组蛋白及其异构体，转录因子等），特别适用于已知启动子序列或整个基因位点的组蛋白修饰分析研究。这项技术采用特定抗体来富集存在组蛋白修饰或者转录调控的DNA片段，通过多种下游检测技术（定量PCR，芯片，测序等）来检测此富集片段的DNA序列。 ChIP技术自诞生之后，已成功的应用于人或动物细胞和组织 [1] 、植物组织 [2] 、酵母

【原创】Protein A Sepharose 之进化篇。。。

洗脱条件比较剧烈，最后收集的蛋白质很有可能变性，或者是复性困难。 这种洗脱条件剧烈的Protein A 柱结合的重组蛋白质A一般具有5个串联结构域：E、D、A、B、C。这种重组蛋白A虽然除去了不重要的非结合域，仅由5个结构域组成，每个域均可以和IgG的Fc段结合，但不同的域结合强度略有差异。因此洗脱条件不均一，而且经常需要较低的pH值。如果减少串联结构域的个数，并且采取同型结构域串联，就可以避免不同结构域与抗体Fc 段亲和性的差异，洗脱条件会温和而均一。为此，我们可以做一个试验，比较一下