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文献和实验Dual- and Triple-Color Fluorospot
labeled with green fluorophore emitting light at the same wavelength as FITC, streptavidin (SA) labeled with Cy3, and if three cytokines are analyzed, a mouse anti-tag mAb labeled with Cy5 (Mabtech). 5. Mouse mAb anti-human CD28 at 0.1 mg/ml
MATERIALS T-cell: CD2 IgG2b, 01171D B-cell: B220 (CD45R) IgG2a, 01121A CD3 IgG2b, 28001D Monocytic: Mac1 (CD11b) IgG2b, 01711A CD5 IgG2a, 01031
Intracellular Cytokine Staining Protocol
)2d/3danti-CD3 (10ug/ml immobilized)+anti-CD28 (2ug/ml soluble) 5hrMonensinJES6-5H4IL-4mouse spleenConA (3ug/ml) (2d)/IL-2 (20ng/ml)+IL-4 (20ng/ml) (3d)2d/3danti-CD3 (10ug/ml immobilized)+anti-CD28 (2ug/ml soluble) 5hrMonensinBVD6-24G2IL-6mouse
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