- ￥1520
- 齐源
- 17102
- 进口/国产
- 2025年12月05日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
QuDye ssDNA Assay Kit (optimized for Qubit®)
- CAS号：
/
- 保质期：
保质期12个月
- 供应商：
齐源生物
- 保存条件：
4℃
- 规格：
100 次
该试剂盒用于使用 Qubit™ 荧光计对单链 DNA (ssDNA) 进行定量。使用该试剂盒，您可以测量寡核苷酸或长 ssDNA 的浓度。
该试剂盒包括浓缩的 QuDye ssDNA 试剂、稀释缓冲液和 ssDNA 定量标准品（0 和 20 ng/uL）。为了对您的样品进行定量，使用缓冲液稀释试剂，添加样品（样品量可以在 1 到 20 uL 之间变化），然后使用 Qubit™ 荧光计进行荧光测量。对于初始样品，测量的 ssDNA 浓度范围为 50 pg/μL 至 200 ng/μL（在染料工作溶液中稀释样品后，测定管中的最终 DNA 含量为 1-200 ng）。
QuDye ssDNA Reagent 还与双链 DNA (dsDNA) 和 RNA 结合，因此应避免在 ssDNA 样本中使用它们。游离核苷酸和其他少量污染物，如盐、去污剂、溶剂和蛋白质对测量结果没有显着影响。
QuDye ssDNA 试剂的宽线性动态范围与测量所需的小样本量 (1–20 uL) 相结合，使该试剂盒成为定量单链 DNA 的快速便捷工具。
| 套件组件 | 数数 | ||
|---|---|---|---|
| 17102 100 次检测 |
18102 100 次检测（包括试管） |
||
| 聚丙烯管（0.5 mL 薄壁透明） | — | 100 | |
| 35010，QuDye ssDNA 试剂，200x，250 uL | 1 | 1 | |
| S3250，TE 缓冲液，1x，50 mL | 1 | 1 | |
| B9650，定量标准品，0 ng/uL TE 缓冲液，1 mL | 1 | 1 | |
| B2650，ssDNA 定量标准品，20 ng/uL TE 缓冲液，1 mL | 1 | 1 | |
保质期12个月。
！请注意，样品温度的波动会显着影响测量结果。避免加热样品；特别是在使用 Qubit™ 荧光计进行荧光测量之前，请勿将分析管握在手中。如果在 Qubit™ 荧光计室中停留的时间很短，则装有样品的试管会变热，因此请在将装有样品的试管放入荧光计室后立即进行测量。如果必须重新读取一个样品，则应在读取后立即将装有样品的试管从荧光计中取出，并仅在测量荧光时才将其放入荧光计室中。
协议
- 准备QuDye ssDNA 染料工作溶液，考虑到每个样品和两个标准中的每一个都需要 200 μL 的染料工作溶液。为此，使用1x TE 缓冲液将QuDye ssDNA 浓缩试剂稀释 200 倍。
例如，要测量 3 个样品和 2 个标准品，制备 200 μL x 5 = 1000 μL 染料工作溶液（混合 5 μL QuDye ssDNA 浓缩试剂和 995 μL 1x TE 缓冲液）。！建议在配制后数小时内使用染料工作液。在延迟测量的情况下，保护准备好的染料工作溶液免受光照。！仅使用塑料容器制备染料工作溶液，因为 QuDye ssDNA 试剂会吸附在玻璃表面，导致样品中染料浓度降低，测量结果出现偏差。
- 为标准设置两个 0.5 mL 管（薄壁和光学透明），为每个样品设置一个管。标记管盖。不要标记试管的侧面，因为这会干扰样品读取。
- 向两个标准管中的每一个添加 190 µL QuDye ssDNA 染料工作溶液 和 10 µL 0 ng/µL（标准 #1）的定量标准或 20 ng/µL（标准 #2）的 ssDNA 定量标准。涡旋 2-3 秒并短暂离心。
- 在每个样品管中分别加入 180–199 µL QuDye ssDNA 染料工作溶液和 20–1 µL 测试样品（总体积应为 200 µL）。涡旋 2-3 秒并短暂离心。
测试样品的稀释是可选的，取决于其初始浓度。初始样品浓度应在 50 pg/µL—200 ng/µL 范围内。在染料工作溶液中稀释样品后，测定管中的最终 DNA 含量应在 1–200 ng 的范围内，以便使用 Qubit™ 荧光计进行测量。同时，避免移取小体积来稀释初始样品，以保持测量的准确性和精密度。
- 将所有试管（包含标准品和 DNA 样品）在室温下孵育 2 分钟。
- 执行荧光测量。
使用 Qubit™ 荧光计进行荧光测量
后续步骤应根据 Qubit™ 荧光计的说明进行。根据荧光计的版本，菜单项可能与下面指定的不同。- 在 Qubit™ 荧光计的主屏幕上，选择ssDNA作为检测类型。按开始。
- 每次制备染料工作溶液时，校准荧光计。选择运行新校准并按执行。
- 将含有Standard #1 的试管插入样品室，盖上盖子，然后按Go。读取完成后（约 3 秒），移除Standard #1。将含有Standard #2的试管插入样品室，盖上盖子，然后按Go。读取完成后，移除Standard #2。
- 将装有用户样品的试管插入样品室，盖上盖子，然后按Go。在屏幕上您将看到 QF 值。
通过公式计算样品浓度：样品浓度 = QF 值 x 200/样品体积。
| 污染物 | 测试样品中的最终浓度 | 荧光变化（增加↑或减少↓） | |
|---|---|---|---|
| 醋酸钠 | 30 毫米 | ↓ | 不显着 （低于 10%） |
| 琼脂糖 | 0.1% | ↑ | |
| 氯仿 | 2% | ↑ | |
| 醋酸铵 | 50 毫米 | ↓ | 中等 (10-20%) |
| 苯酚 | 0.2% | ↓ | |
| 乙醇 | 10% | ↑ | |
| 海卫 X-100 | 0.1% | ↑ | |
| 牛血清白蛋白 | 2% | ↑ | 显着 （超过 20%） |
| IgG | 0.1% | ↓ | |
| 氯化钠 | 100 毫米 | ↓ | |
| 氯hua锌 | 1 毫米 | ↓ | |
| 氯化镁 | 5 毫米 | ↓ | |
| 尿素 | 2 М | ↑ | |
| 十二烷基硫酸钠 | 0.01% | ↑ | |
| 聚乙二醇 | 1% | ↑ | |
| 三磷酸腺苷 | 0.1% | ↑ | |
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