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- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海富雨生物
- 英文名:
人骨髓间充质干细胞
- 规格:
T25
永生化人骨髓间充质干细胞
一、 产品简介
1 、产品名称:永生化人骨髓间充质干细胞
2 、细胞来源:原代人骨髓间充质干细胞
3 、产品规格:1×106 细胞/T25 方瓶
4 、细胞简介:
骨髓间充质干细胞是干细胞家族的重要成员,来源于发育早期的中胚层和外胚层。骨髓间充质干细胞 最初在骨髓中发现,因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而 日益受到人们的关注。如间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下,可分化为脂肪、骨、软骨、肌
肉、肌腱、韧带、神经、 肝、心肌、内皮等多种组织细胞,连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜 能,可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。
本公司生产的永生化人骨髓间充质干细胞采用密度梯度离心法和 SV40T 慢病毒制备而来,细胞总量约 为 1×106/T25 方瓶以上;不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基信息:
我们推荐使用公司研制的永生化人骨髓间充质干细胞专用完全培养液(产品编号:IH1003-5,低糖 DMEM+10%FBS+1%双抗)作为体外培养人骨髓间充质干细胞的培养基。
二、使用方法
1 、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出 T25 方瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中静置 2-3 小时, 以稳定细胞状态,然后打开瓶子回收瓶子中培养液作为后续培养此细胞的完全培养液(备注: 先使用瓶子 中完全培养液培养及尽快冻存保种细胞,保存种子后再尝试自己完全培养液培养观察是否适合此细胞生
长,以免使用自己培养液不适合细胞生长造成细胞状态不好或死亡),最后按照后面细胞传代步骤进行细 胞传代培养。
2 、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃 T25 方瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞 3 次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约2ml 至培养瓶中,37℃培养箱消化 5-8min ,倒置显微镜下观察,待
细胞脱落后加入完全培养液终止消化,然后将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm/min,离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 10ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3 、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃 T25 方瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞 3 次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约2ml 至培养瓶中,37℃培养箱消化 5-8min ,倒置显微镜下观察,待 细胞脱落后加入完全培养液终止消化,然后将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm/min,离心
5min;
3)用适当量的冻存液(完全培养基:FBS :DMSO=7:2:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1h,然后将其移入-80℃过夜(或者放置梯度降温盒直接放置- 80℃) , 24h 后转入液氮中进行长期保存。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存 管中无结晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞转移至含 5ml 完全培养液无菌离心管中,1200rpm 离心 5min ,然后加入 5ml 完 全培养液混匀细胞,将细胞悬液转移至 T25 培养瓶中,放置于37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中培养;
3)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single-cell transcriptome sequencing data
期刊:MODERN ONCOLOGY,Aug.2023,VOL. 31,No. 16
作者:HU Wu1,WEN Yiqiao2,QIN Jialan1,ZHAO Ying3,ZHANG Tianbiao1
DOI:10.3969 /j.issn.1672-4992.2023.16.003
实验大纲 骨髓间充质干细胞是多能干细胞。因此,作为再生医学的细胞来源,它是活性研究和临床应用的目标。当骨髓液或骨髓细胞接种在培养皿上时,间充质干细胞会作为粘附细胞增殖。因此,间充质干细胞可以从漂浮的血细胞中分离出来。在此,我们报告了使用 Evident Prov CM20 培养监测系统对间充质干细胞原代培养的远程监测结果。 试验程序 使用补充了 10% 胎牛血清(FBS)和 1% 青霉素链霉素的 Iscove 改良 Dulbecco 培养基(IMDM),将市售人骨髓细胞以 950,000
人类组织正常及永生化细胞293E E转化人胚肾293细胞(B类)293ET ET转化人胚肾293细胞(B类)293KB KB转化人胚肾293细胞(B类)293T 人胚肾T细胞A7d 野生型人C-KIT受体细胞株(B类)AMS3(SCF3) 人干细胞因子单克隆抗体细胞株(B类)APP-PS1 人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293)(B类)FC33 ASP2 人胚胎肾细胞转化细胞(B类)FIP293 FIP293(来源于HEK293)(B类)HEK-293 人胚
心得如下: 1、 GES长的非常快,而且比较大,呈成纤维细胞样,细胞长得越好,铺的越开。 2、传代一般1:3传,每3天需要再传。 2、永生化细胞,不要等细胞100%汇合再传代,多次这样细胞容易球形增加,还不容易洗掉。 3、用胰酶(0.25%)--EDTA(0.01%)混合消化液消化好些,一般1分钟左右呈球形,即可混悬细胞了。 4、培养液用10%小牛血清的DMEM或1640都可以。 步骤: 吸净培养液,胰酶洗1次,倒尽,加胰酶消化液置于37度,在显微镜下注意观察,细胞变圆后,倒掉
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