货号:M2350 规格:5 mL 保存:2-8℃,保质期 2 年 产品内容: Strep-Tag 系统是模拟链霉亲和素-生物素系统的新型蛋白纯化系统,Strep-Tactin 对 Strep-Tag II 的亲和能力与链霉亲和素相比,至少强 10 倍以上,且分离纯化条件温和,在生理条件下即可实现蛋白的分离纯化;此外,与其他 tag 相比,Strep-Tag II 为 8 个氨基酸的小标签(WSHPQFEK),由于标签小,仅为1 kDa左右,不影响融合后蛋白质的结构和功能。这些温和的纯化参数能保存蛋白质的生物活性, 并仅经一步提取即可产出超过 99%的纯度。Beads Magrose Strep-Tactin 磁珠采用特殊的蛋白偶联工艺,将 Strep-Tactin 蛋白共价偶联到超顺磁性磁珠表面,制备了一种专为高效、快速分离纯化Strep-tag II 蛋白的一种新型功能化材料,实现并搭建了提取速度、提取量及纯度兼得的蛋白纯化平台。 产品特性:
产品名称
Beads Magrose Strep-Tactin
磁珠粒径
30~150 μm
配基含量
~6 mg Strep-Tactin /mL Gel
融合蛋白结合量 1
~7 mg Strep-tag II 蛋白/mL Gel
悬液浓度
10%( v/v)磁珠悬液
保存液
1×PBS(含0.1%Tween-20)
Binding/Washing Buffer
10 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, 1 mM EDTA, pH 8.0
Elution Buffer
2.5 mM desthiobiotin in Binding Buffer
Regeneration Buffer
0.5 M NaOH or 1 mM HABA in Binding Buffer
注意:磁珠蛋白结合量与目标蛋白特性相关,此处仅做参考值。 适用范围: 可用于从任何表达系统,包括杆状病毒、哺乳动物细胞、酵母和细菌中含有 Strep-Tag II 标签蛋白的分离纯化。 操作步骤: 目标蛋白与磁珠的结合性能将直接影响目标蛋白的纯化效率,各种缓冲液配制也将在一定程度上影响目标蛋白的回收率和纯度。以下提供一个较为广泛应用的Strep-Tag II 蛋白的纯化流程,用户可参考该操作流程,或者根据自己蛋白的特性自行设计和优化蛋白纯化流程。
1、缓冲溶液配制
Binding/Washing Buffer :10 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, 1 mM EDTA, pH:8.0 Elution Buffer:2.5 mM desthiobiotin in Binding Buffer。
2、样品处理
大肠杆菌、酵母等细胞内表达蛋白:表达细胞用适量 Binding Buffer 稀释,加入蛋白酶抑制剂(如终浓度为 1 mM 的 PMSF);冰浴超声裂解细胞,即为粗蛋白样品。如果样品过于粘稠,可根据需要在粗样品中加入适量核酸酶,在冰上放置 30 min,以降解核酸。另外,如果目标蛋白含量较低,建议将粗蛋白样品进行离心操作。