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北京索莱宝科技有限公司
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500ml
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文献和实验1. 标本固定——不仅仅是「切一切」和「泡一泡」温柔地取材:大刀阔斧取材的同时,视组织如珍宝,莫挤压组织,轻柔取材和镊取。尽量避开坏死区域。太大太厚的组织不利于均匀一致的固定,实质组织取材厚度应小于 5 mm。新鲜的固定液: 固定液 10% 中性缓冲福尔马林 (NBF) 需新鲜配置,商用型固定液注意其标注的有效期,避免使用过期变质的固定液。充分及时地固定:固定液要充足,其与组织的体积比最好大于等于 20 倍;取材后即刻固定。固定时需将瓶口封住,避免甲醛挥发。组织的固定时间不宜过长,一般过夜(12~24
,也是最无法补救的一步。通常选用 10% 中性缓冲福尔马林 (ph 值 7.2-7.4) 进行固定,避免酸性或无缓冲福尔马林对核酸的降解。由于手术或活检组织很可能在手术过程中就已出现血氧供应不足,因此组织需要在离体后 30 min内尽快固定。 组织标本需要充分且适度的固定,固定不足导致深处组织未接触到福尔马林而出现核酸和蛋白质降解,过度固定又会导致组织内交联严重加大核酸提取难度。组织标本厚度、福尔马林溶液的体积、固定时间是影响固定程度的三个重要因素。 福尔马林大约以 2-3 mm/24 h 的速度穿透实体
固定是免疫组化的第一步,很多人都忽视了这一步,认为用福尔马林就行,其实学问也挺大的用于免疫组织化学的固定剂种类较多,性能各异,在固定半稳定性抗原时,尤其重视固定剂的选择,介绍如下。 1.醛类固定剂 双功能交联剂,其作用是使组织之间相互交联,保存抗原于原位,其特点是对组织穿透性强,收缩性小。有人认为它对IgM、IgA、J链、K链和λ链的标记效果良好,背景清晰,是常用的固定剂。 (1)10%钙-福尔马林液(浓甲醛10ml,饱和碳酸钙90ml)。 (2)10%中性缓冲福尔马林液(浓甲醋10
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