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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Acute Myeloid Leukemia Cells
- 库存:
999
- 供应商:
-
- 肿瘤类型:
-
- 细胞类型:
详见说明书
- 品系:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 相关疾病:
-
- 物种来源:
人
- 免疫类型:
详见说明书
- 细胞形态:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
-
- 器官来源:
详见说明书
- 运输方式:
常温/干冰
- 年限:
详见说明书
- 生长状态:
详见说明书
- 规格:
1×10⁶cells
一.细胞介绍
该细胞来源于一个20岁的患有急性髓细胞样白血病的男性患者的外周血。该细胞携带FLT3的内部重复序列。FLT3蛋白未表达,细胞携带CBLδ-外显子8突变体。
二.细胞特性
(1)来源:急性髓细胞样白血病
(2)形态:圆形,悬浮生长
(3)含量:>1x10⁶cells
(4)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
(5)用途:仅供科研使用。
三.培养基及培养冻存条件准备
(1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, acetone酸钠 0.11g/L),85%;优质胎牛血清,15%。
(2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
(3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
四.运输和保存
(1)冻存细胞:1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)复苏好的活细胞:T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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细胞接收后的处理:
(1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
(2)请在4或5x显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
(3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
(4)注意:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代。
细胞处理:
(1)冻存细胞的复苏:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8mL完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
(2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4mL含10%FBS的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8mL按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
(3)细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面以T25瓶为例:
(1)细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL。
(2)1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞,按每1mL冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
(3)将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80℃冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存,同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
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文献和实验按FAB形态学分类,可将急性淋巴细胞白血病分为三种亚型: 1.L1型 以小细胞为主,核染色较粗,每例结构一致。核型规则呈圆型,偶有凹陷或折叠,核仁小而不清楚或不见。胞浆少,轻度或中度嗜碱性,胞浆有空泡不定。 2.L2型 以大细胞为主,混有一定数量的小细胞,大小不等明显。核染色质疏松,每例结构不一致。核形不规则,凹陷和折叠常见。核仁清楚,一个或多个,胞浆量不定常较多,浆深浅不一,有的深染,浆液可有空泡。医学教育网搜|集整理 3.L3型 以大细胞为主,大小较一致。核
急性混合细胞白血病依白血病细胞来源及表达不同分两种类型: 1.双表型:在混合细胞白血病中,确定有大于或等于10%的恶变细胞,既有淋巴细胞系,又有髓细胞系特性。 2.双系型:也可命名为双克隆型(同时有两种或多种分别表达髓系或不同淋巴系标记的白血病细胞)。检验包括细胞形态学(Auer小体)、细胞化学(包括免疫细胞化学及超微结构)、单克隆抗体医学教育|网搜集整理、E玫瑰花结、SmIg、C1q、遗传及分子生物学。依据以上多方面检测,进行综合判断,才能诊断本病。大多数病人有t
骨髓增生极度或明显活跃,少数病例是增生活跃,以原始和幼稚淋巴细胞为主,大于30%,可高达50%一90%胞核形态不规则,可有凹陷、折叠、切迹、裂痕,红细胞系统、粒细胞系统增生受抑制,巨核细胞系减少或不见,血小板减少,退化细胞增多。 按FAB形态学分类,可将急性淋巴细胞白血病分为三种亚型: 1.L1型:以小细胞为主,核染色较粗,每例结构一致医学教育|网搜集整理。核型规则呈圆型,偶有凹陷或折叠,核仁小而不清楚或不见。胞浆少,轻度或中度嗜碱性,胞浆有空泡不定。 2.L












