- ￥2800
- YLKBIO
- YLK-PCR0217
- 国产
- 2026年04月07日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Human Coronavirus OC43 (HCoV-OC43) Probe qRT-PCR Kit
- 保质期：
1年
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50T
冠状病毒在系统分类上属冠状病毒科（ Coronaviridae ） 冠状病毒属
（Coronavirus）。冠状病毒属的病毒是具外套膜的正链单股 RNA 病毒，直径约 80-120nm，其遗传物质是所有 RNA 病毒中最大的，只感染人、鼠、猪、猫、犬、禽类脊椎动物。本产品就是以探针法荧光定量 RT-PCR 技术为基础开发的专 门检测人冠状病毒 OC43 的试剂盒，它具有下列特点：
- 即开即用，用户只需要提供样品 RNA 模板。
- 引物和探针经过优化，灵敏性高。
- 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
- 特异性高，引物是根据人冠状病毒 OC43 高度保守区设计，不会跟其他病毒的 RNA 发生交叉反应。
- 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
- 本产品只能用于科研。
规格及成分
| 成分 | 十孔盒包装 |
| 探针法 qRT-PCR 缓冲液 | 500μL（蓝盖） |
| 探针法 qRT-PCR 酶混合液 | 100μL（红盖） |
| 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） |
| 人冠状病毒OC43 探针法qRT- PCR引物混合液 |
100 μL（白盖） |
| 人冠状病毒 OC43 qRT-PCR 探针 | 50 μL（棕色管） |
| 人冠状病毒OC43 探针法qRT- PCR阳性对照(1×10E8 拷贝/μL) |
50 μL（黄盖） |
| 使用手册 | 1 份 |
| 运输及保存 | 低温运输，-20℃保存，保存期限为 12 个月。 |
| 自备试剂 | 样品 RNA。 |
| 使用方法 | 一、稀释标准曲线样品（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能 污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原， 本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的 DNA 片段作为阳性对照。1. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
|
- 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
- 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
- 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。二、样品 RNA 的制备
- 如果有 N 个样品，最好设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳性
- 用自选方法纯化样品的 RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 RNA 提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的柱式病毒RNAout。
三、Probe qRT-PCR 反应（20μL 体系，在样品制备室进行）
- 如果做定量分析并且只做 1 次重复，则标记 N+9 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），6 个用于标准曲线。如果做定性分析，并且只做 1 次重复，则标记 N+4 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），1 个用于 PCR 阳性对照（用第 4 号管的阳性对照稀释液做模板）。下面只以定量分析为例描述操作步骤。
- 在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设 置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好
成分 样品管
N+2 个
RT-PCR
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
标准曲线样品管
（2-7 管）样到 2 号管，
3 号样到 3 号管…）
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 逆转录 | 50℃ | 30 min |
| 预变性 | 94℃ | 10 min |
| qRT-PCR 反应 （40 个循环） |
94℃ | 15 sec |
| 60℃ | 1 min（采集 FAM 通道的荧光信号） |
五、数据处理
- 如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品RNA 浓度的 log 值，再推算出其浓度。
- 如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照 Ct 必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲线，Ct 值应该小于或等于 30。对待测样品，如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性，如果小于或等于 35 则为阳性。如果在 35-40 之间，则重复一次。重复实验的 Ct 值如果大于或等于 40 则为阴性，如果小于 35，则为阳性。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验新型冠状病毒背景介绍与核酸检测整体解决方案分享，从核酸模板制备到 RT 实验策略，再到 qPCR 实验解析与应用。
怎么整板都没有扩增曲线，是哪一步实验出问题了吗？ 这个病原体这段时间怎么经常检出？不会是有污染了吧？ 在您看到荧光定量 PCR 结果的时候是否也有过这样的疑问？隐隐约约感觉实验某个步骤出现问题，却又不知该从何下手。别担心，有「对照精灵」们来助您一臂之力。 荧光定量 PCR 实验，从样本采集到结果分析包含多个实验步骤，针对不同的步骤，可以选择不同的对照对流程进行监控（图 1）。 图 1. 实验流程和常见阴阳性对照种类。 阴性对照 荧光定量 PCR 的灵敏度可以达到 1 拷贝/孔，如此高灵敏
actin,山东大学提供样品基因。cDNA制备：测定小鼠肝脏总RNA浓度后，使用BioTeke Super RT Kit 制备20μl cDNA.操作步骤参照试剂盒说明书。一步法荧光定量PCR：Bioteke One-step SYBR real-time RT-PCR Kit20μl反应体系包括：10μl 2×One-step SYBR premixture，7.2μl RNA Free Water，0.4μl Primer F，0.4μl Primer R，1μl cDNA，1μl One-step
技术资料
