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嘌呤霉素无菌溶液
MCE 国际站:嘌呤霉素无菌溶液
MCE Puromycin, Sterile 来源于白黑链霉菌(Streptomyces alboniger),是一种氨基糖苷类抗生素,可以通过抑制蛋白质合成从而杀死多数革兰氏阳性菌及各种动物或昆虫细胞,在某种特殊情况下也可有效作用于大肠杆菌。
Description & Advantages:
Puromycin is an aminonucleoside antibiotic produced by Streptomyces alboniger. It inhibits protein synthesis by disrupting peptide transfer on ribosomes, causing premature chain termination during translation. It can kill most gram-positive bacteria and various animal or insect cells.
Resistance to Puromycin is conferred by the puromycin N-acetyl-transferase gene (pac) from Streptomyces alboniger. Therefore, Puromycin is a popular and effective antibiotic for selecting vectors bearing the pac gene in mammalian cell lines and E. coli.
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文献和实验商品化试剂和培养基均经过严格的质量控制以保证其无菌,但它们在操作过程中可能被污染。请遵循以下指导原则进行无菌操作,避免污染。请始终使用适当的灭菌方法(如高压灭菌器、除菌过滤器)对实验室中配制的任何试剂、培养基或溶液进行灭菌。 无菌操作 请始终用 70% 乙醇擦拭双手和工作区。 将容器、培养瓶、培养板和培养皿放入细胞培养通风橱之前,先用 70% 乙醇擦拭其外部。 不要直接从试剂瓶或培养瓶中倾倒培养基和试剂。 使用无菌玻璃或一次性塑料移液管和移液器操作液体时,每只移液管只能使用一次,以避免
一、环境和液流的消毒 1、准备足量的无菌1×PBS(3L左右)和去离子水(10L左右)。PBS和去离子水可高压灭菌,sheath桶和装DI水的5L小桶依次用75% 医用酒精和无菌去离子水各涮洗三次,然后将无菌PBS和去离子水分别注入相应桶内即可。 2、房间在分选前紫外灯照射15-20分钟;用1:50新洁尔灭拖地;用75% 医用酒精擦拭工作台和收集架;用75% 医用酒精喷洒分选细胞收集区和上样区。 二、开机和管道的消毒 1、将Sheath液换为活性氯浓度为0.5% 的次氯酸钠溶液(不要
% 的汇合度。 2. 在合适的限制性内切酶位点使质粒线性化,并把每秒质粒的浓度调整为≥ 0.5 mg/ml 。 10 ~ 20 μ g 质粒 pTet-tTAk 和 1 ~ 2 μ g pSV2-His ( Tet 质粒与带选择标记的质粒的摩尔比大约为 10 : 1 )与 500 μ l HEPES 缓冲液在一个干净的 4 ml 聚丙乙烯管中混合。 3. DNA 混合物中加入 32.5 μ l 2 mol/L CaCl2 。立即轻轻振荡使溶液混匀。溶液在室温
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