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2-8℃避光保存,不得冻存。产品有效期12个月。
- 英文名:
Goat anti-Mouse/Rabbit Poly-HRP Secondary Antibody
- 规格:
110ml/18ml/55ml/6ml
| 规格: | 110ml | 产品价格: | ¥10800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 18ml | 产品价格: | ¥1980.0 |
| 规格: | 55ml | 产品价格: | ¥5600.0 |
| 规格: | 6ml | 产品价格: | ¥750.0 |
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文献和实验问:有没有做辣根过氧化物标记的朋友啊,能不能把你们的步骤发给我。本人开始做,发现很多人用的浓度都不一样。答:1.1 试剂准备1) 10mg/mL HRP2) 0.06mol/L NaIO43) 0.16mol/L乙二醇4) 碳酸盐缓冲液(Na2CO3 0.7952g NaHCO3 1.4702g 溶于500mL蒸馏水中,调pH值到9.5)5) 2.5mg/mL NaBH46) 0.01mol/L磷酸盐缓冲液,pH7.41.2 操作步骤1. 10mg/mL取HRP VmL,溶液为棕黄色,加入
mlTBS/T洗3次(5 min/T)。 4.加入合适稀释度的一抗,室温孵育1-2h或4°C过夜,缓慢摇动。 5.15 ml TBS/T洗3次(5 min/T)。 6.加入合适稀释度的碱性磷酸酶(AP)或辣根过氧化酶(HRP)标记的二 抗,室温孵育1h,缓慢摇动。 7.15 ml TBS/T洗3次(5 min/T)。 8.15 ml TBS洗1次。 9.蛋白检测( 显色法或发光法,按相应试剂说明操作) 。
一、戊二醛二步法1. 原理戊二醛为一种双功能试剂,通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合,形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。2. 标记步骤(1)称取HRP25mg溶于1.25%戊二醛溶液中,于室温静置过夜。(2)反应后的酶溶液经Sephadex G-25层析柱,用生理盐水洗脱。流速控制在1ml/1分钟,收集棕色流出液。如体积大于5ml,则以PEG浓缩至5ml。放置25ml小烧杯中,缓慢搅拌。(3)将待标记的抗体12.5mg用生理盐水稀释至5ml,搅拌下逐滴加入酶溶液中。(4)用1M
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