- ￥1896 - 3860
- 博尔森生物
- BES2272PCR
- 中国/上海
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
999
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
48T 非一管式/48T 0.1PCR管/48T 0.2PCR管
| 规格： | 48T 非一管式 | 产品价格： | ￥1896.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 48T 0.1PCR管 | 产品价格： | ￥3860.0 |
| 规格： | 48T 0.2PCR管 | 产品价格： | ￥3860.0 |
非洲猪瘟病毒（ASFV）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
产品说明本试剂盒适用于动物病料、鼻咽拭子、血液等样品中非洲猪瘟病毒的特异检测，适用于非洲猪瘟病毒（ASFV）的辅助诊断、监测及流行病学调查，检测结果仅供临床参考，
产品组成（48 测试）
◆ 适用仪器
ABI 7500、CFX 96、Mx 3005P、LineGene9600 等实时荧光 PCR 仪。
◆ 自备耗材和仪器
①冰盒；②移液器（0.5-10μL，10-100μL，100-1000μL）及配套灭菌吸头；③离心机；④涡旋混匀器；⑤金属浴；⑥均质机、搅拌机或研钵等研磨器具；⑦电子天平。
◆ 注意事项
1．本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。
1）第一区：样本制备区。
2）第二区：模板添加区。
3）第三区：扩增及产物分析区。
★ 分区之间最好进行物理性隔离，避免人为因素造成的污染。
2．实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。
3．严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
4．反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心 30秒，并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。
5．反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。
6．不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。
7．鉴于 ASFV 为一类检疫性疫病，上述操作应在相关生物安全设施内进行。对样品及其废弃物的操作应严格遵守生物安全规定。
8．本试剂盒仅供研究使用，不用于临床诊断。
◆ 样品处理
参照相关标准采集样品，短期保存于-20℃，长期保存请放置于-80℃。
1. 样品的采集、处理和保存
采样过程中样本不得交叉污染，采样及样品前处理过程中须戴一次性手套。
2. 采样工具
剪刀、镊子、研钵、采样管（1.5 mL 离心管或其他规格）。上述取样工具必须经 121±2℃，15 min 高压灭菌并烘干或经 160 摄氏度干烤 2 h。
无菌采样袋。
3. 样品采集
（1）血液样品：用无菌抗凝血真空管采集猪血液，编号。
（2）淋巴结、脾脏、肌肉等样品：用无菌剪、镊采集待检脏器，装入无菌采样袋或其它灭菌容器，编号。
（3）扁桃体：利用扁桃体采样器（鼻捻子、开口器和采样枪）。采样器使用前均须用 3%氢氧化na溶液消毒后经清水冲洗。首先固定活猪的上唇，用开口器打开口腔，用采样枪采取扁桃体样品，用灭菌牙签挑至灭菌离心管，
4. 样品贮运
样品采集后，放入密闭的塑料袋内（一个采样点的样品放一个塑料袋），置保温箱中加冰、密封，24 h 内送实验室。
5. 样品处理
血液样品直接用；淋巴结、脾脏、扁桃体、肌肉等样品，用无菌的剪刀和镊子剪取待检样品 2 g 于研钵中充分研磨，再加 10 mL PBS（pH 7.2，含 1 万单位青霉素和 1 万单位链霉素）混匀（样品不足 2 g 按 1:5 比例加 PBS），对处理的待检样品置 70℃，30 min 灭活后，3 000 r/min，4 ℃离心 5 min，取上清液，编号备用；血球粉处理方法同上，省掉研磨步骤。
6. 样品存放
采集或处理好的样品在 2℃～8℃条件下保存应不超过 24 h；若需长期保存，须放置-80 ℃冰箱，但应避免反复冻融（冻融不超过 3 次）。
◆ 实验操作
1.模板制备（样本制备区）
建议使用配套动物总 DNA/RNA 提取试剂盒系列产品，具体过程详见产品说明书。
2.添加模板（模板添加区，放置于冰盒上进行）
剪下所需测试数的已含有反应液的 PCR 管，放置在室温待解冻后，离心 30 秒后揭开封口膜，向每管反应液中分别加入 5μL 模板，顺序为 NG、待测样品模板、PG-ASFV-P。盖好配套的 PCR 管盖后，涡旋混匀 30s，离心 1min，立即进行 PCR 扩增反应。
3. 扩增反应（扩增及产物分析区）
使用荧光定量 PCR 仪，荧光基团选择 FAM，淬灭基团选择 TAMRA。
按下列条件设置扩增反应：
其他仪器请参照仪器说明书进行设置。
◆ 结果判定
检测样品无 Ct 值或≥40，曲线为直线或轻微斜线，无“S”型扩增曲线，可报告样品阴性，不含有非洲猪瘟病毒（ASFV）或含量低于检出限；
检测样品 Ct≤36，曲线呈“S”型扩增曲线，可直接报告样品阳性，含有非洲猪瘟病毒（ASFV）；
检测样品 36<Ct≤40，需进行一次重复实验，若 Ct 值仍处于 36 和 40 之间且呈“S”型扩增曲线，同时阴性对照无 Ct 值，报告样品阳性，否则报告样品阴性。
NG 反应管结果显示“阴性”，PG 反应管结果显示“阳性”，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。
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非洲猪瘟病毒（ASFV）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
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