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Percoll 细胞分离液 Pharmacia 17-0891-01 100ml
Ficoll400 聚蔗糖400 Pharmacia 17-0300-01 10g
甲叉双丙烯酰胺 Amresco 0172 25g
甲叉双丙烯酰胺 Amresco 0172 100g
Bind-Silane 亲和硅烷 国产 **** 25ml
Repel-Silane 剥离硅烷 国产 **** 200ml
CM Cellulose 羧甲基纤维素 Sigma C-4888 100g
Methyl Cellulose 甲基纤维素 Sigma M-0512 100g
SephadexG-10 葡聚糖凝胶G-10 Pharmacia 17-0010-01 25g
SephadexG-15 葡聚糖凝胶G-15 Pharmacia 17-0020-01 25g
SephadexG-25 葡聚糖凝胶G-25 Pharmacia 17-0033-01 25g
SephadexG-50 葡聚糖凝胶G-50 Pharmacia 17-0043-01 25g
SephadexG-75 葡聚糖凝胶G-75 Pharmacia 17-0050-01 25g
SephadexG-100 葡聚糖凝胶G-100 Pharmacia 17-0061-02 25g
SephadexG-150 葡聚糖凝胶G-150 Pharmacia 17-0070-02 25g
SephadexG-200 葡聚糖凝胶G-200 Pharmacia 17-00810-02 25g
Sephadex CL-4B 琼脂糖凝胶 CL-4B Pharmacia 17-0150-01 100ml
Sephadex CL-6B 琼脂糖凝胶 CL-6B Pharmacia 17-0160-01 100ml
SephadexLH-20 葡聚糖凝胶LH-20 Pharmacia 17-0710-01 25g
DEAE Sephadex 葡聚糖凝胶A-25 Pharmacia 17-0170-01 25g
DEAE Sephadex 葡聚糖凝胶A-50 Pharmacia 17-0180-01 25g
DEAE Sepharose fast flow DEAE琼脂凝胶FF Pharmacia 17-0709-01 25ml
CNBR Activated Sepharose 4B 溴化氰活化琼脂糖凝胶4B Pharmacia 17-0430-01 5g
Agar 琼脂粉 Japan **** 100g
Agar 琼脂粉 Japan **** 500g
Cholesterol 胆固醇 国产 **** 100g
Lactalbumin Hydrolysate 水解乳蛋白 Difco 259962 100g
Casein 酪蛋白 Sigma C-5890 100g
Phytagar 植物凝胶 Sigma P-8169 100g
YNB 无氨基酵母氮源 Difco 291920 100g
Skim Milk Powder 脱脂奶粉 Difco 232100 10g
1640培养基 1640 Medium(原装) Invitrogen 31800-022 10X1L
DMEM(高糖)含丙酮酸钠(原装) Invitrogen 12800-017 10X1L
DMEM(低糖)DMEM(Low Glucose)(原装) Invitrogen 31600-034 10X1L
DMEM(高糖) DMEM(High Glucose)(原装) Invitrogen 12100-046 10X1L
MEM培养基(原装) Invitrogen 41500-034 10X1L
M199培养基 M199 Medium(原装) Invitrogen 31100-035 10X1L
F12培养基 Nutrient Mixture (Ham)(原装) Invitrogen 21700-075 10X1L
D-MEM/F-12培养基(原装) Invitrogen 12400-024 10X1L
IMDM培养基(原装) Invitrogen 12200-036 10X1L
B27添加剂 (原装) Invitrogen 17504-044 10ml
N2添加剂 (原装) Invitrogen 17502-048 5ml
特级胎牛血清(原装) Invitrogen 16000-044 500ml
特级胎牛血清(原装) Hyclone SH30070.03 500ml
新生牛血清(无支原体) 四季青 **** 200ml
胎牛血清(无支原体) 四季青 **** 100ml
胰蛋白胨(原装) OXOID L42 500g
酵母粉(原装) OXOID L21 500g
Albumin Human Serum 人血清白蛋白(V) Sigma A1653 250mg
Albumin Human Serum 人血清白蛋白(V) Sigma A1653 1g
Avidin 亲和素 Calbiochem 189725 1mg
Avidin 亲和素 Amresco 0866 1mg
Streptavidin 链亲合素 Calbiochem 189730 1mg
Acetyl-Coenzyme A 乙酰辅酶A Sigma A2056 1mg
Acetyl-Coenzyme A 乙酰辅酶A Roche 10107907001 1mg
Albumin BovineV 牛血清白蛋白(组份五) Roche 10735078001 5g
Albumin BovineV 牛血清白蛋白(组份五) Sigma A7906 5g
Albumin BovineV 牛血清白蛋白(组份五) Amresco 0332 5g
Albumin BovineV 牛血清白蛋白(组份五) Amresco 0332 25g
Albumin Egg 鸡卵清白蛋白 Sigma A5253 10g
Collagen Type I 胶原蛋白I型 Sigma C9879 1g
Con A TypeIV 刀豆球蛋白A 四型 Sigma C2631 25mg
CytochromeC 细胞色素C(马心) Sigma C7752 25mg
CytochromeC 细胞色素C(牛心) Sigma C2037 25mg
Fibrinogen 纤维蛋白原(牛血) Sigma F8630 100mg
Hemoglobin 牛血红蛋白 Sigma H2625 5G
低分子量蛋白标准 Pharmacia原装 17-0446-01 1vail(575ug)
高分子量蛋白标准 Pharmacia原装 17-0445-01 1vail(575ug)
中分子量蛋白标准 Pharmacia原装 17-0615-01 1vail(575ug)
低分子量蛋白标准 上海 **** 20次
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文献和实验聚丙烯酰胺的特性,包括机械性能,弹性,透明度,孔径大小取决于T,C,T是两个单体(单体丙烯酰胺和N-N’-甲叉双丙烯酰胺)的总百分浓度,C是与总浓度有关的交联百分比浓度。 T=(a+b)/m C=b/(a+b) (a为单体丙烯酰胺的克数,b为N-N’-甲叉双丙烯酰胺的克数,m为缓冲液终体积) a,b的比例很关键,如果a:b 小于10,胶脆,硬 如果a:b 大于100,胶糊状。 一般有弹性,透明的胶,a:b比例应在30。一般的胶联度是随着T的增加而降低的,在5%-20%交联
【实验目的】 1.掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理。 2.学习盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术,用于分离蛋白质。 【实验原理】 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺作为支持物的一种电泳形式。单体-丙烯酰胺和交联剂-甲叉双丙烯酰胺相互作用可形成聚丙烯酰胺,该聚合反应以TEMED作为催化剂,以APS 作为引发剂。 丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺的比例可决定凝胶网孔
①聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和N,N'甲叉双丙烯酰胺聚合而成的大分子。凝胶有 格子是带有酰胺侧链的碳-碳聚合物,没有或很少带有离子的侧基,因而电渗作用比较小,不易和样品相互作用。 ②由于聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的物质,在聚合前可调节单体的浓度比,形成 不同程度交链结构,其空隙度可在一个较广的范围内变化,可以根据要分离物质分子 的大小,选择合适的凝胶成分,使之既有适宜的空隙度,又有比较好的机械性质。一 般说来,含丙烯酰胺7-7.5%的凝胶,机械性能适用于分离分子量范围不1万至100
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