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- 缺血性脑梗死具有高发病率、高死亡率、高致残率的特点。由于小鼠的脑血管解剖特点与人类较为相似，故小鼠广泛应用于缺血性脑梗死的研究当中
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小鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型
小鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型
缺血性脑梗死具有高发病率、高死亡率、高致残率的特点。由于小鼠的脑血管解剖特点与人类较为相似，故小鼠广泛应用于缺血性脑梗死的研究当中。缺血性脑梗死除了会影响缺血的区域之外，还会影响相关的神经甚至整个中枢神经系统。因此小鼠缺血性脑梗模型有助于研究神经连接和大脑整体的改变。这有助于推动缺血性脑卒中等脑科学的进步。(1)
随着分子影像学的发展，利用缺血组织中某些具有特征性标记物的改变来进行细胞分子水平的早期、特异性诊断越来越受到重视。同时，这类用于诊断的特异性对比剂还可以携带治疗性药物，使得治疗和诊断做到二合一。(2)
本文以小鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型为例，介绍一种实验动物脑卒中研究中广泛运用的建模方法，供参考。
小鼠大脑中动脉栓塞（MCAO模型）制作方法
1// 实验动物和材料
线栓和小鼠
| 硅胶头直径mm |
硅胶长度mm |
线径-尼龙线号 |
总线长mm |
动物体重g |
小鼠品系 |
| 0.2-0.21 | 3.0-4.0 | 0.1-0.12 | 30 | 22-24 | C57BL/6 |
2// 模型制作
将小鼠进行呼吸诱导麻醉（异氟烷）后，以仰卧位固定于操作台上，继续维持麻醉，常规消毒，备皮，取颈部正中切口，分离右侧颈部总动脉（CCA）、劲内动脉（ICA）和颈外动脉（ECA），结扎ECA远心端，在ECA起始端留置结扎线，用动脉夹将ICA远心端、CCA近心端夹闭。在ECA远心端结扎线外离断，将ECA拉至与ICA成一条直线，于结扎线近端用显微剪剪一斜口，将MACO栓线缓缓送入，栓线通过ECA近心端结扎线进入ICA后，单道结扎ECA近心端结扎线，使栓线与血管相对固定，随即松开ICA上的动脉夹，缓慢上提ECA近心端结扎线，将栓线缓慢送入，进线至线栓刻度位置。
缺血后再灌注：栓线插入40 min后拔出，随后将ECA近心端结扎线结扎，松开CCA近心端动脉夹，碘伏消毒后逐层缝合切口。
小鼠术后37度保温和护理。
3// 行为学评分
采用Longa等的5级4分法标准对模型动物进行评价，0分：无神经功能缺损症状；1分：出现左侧 Honer征，轻度神经功能缺损；2分：提尾对侧前肢内旋，肩内收，中度神经功能缺损；3分：向对侧转圈、向对侧倾倒，重度神经功能缺损；4分：不能自发行走，部分意识丧失。
小鼠侧倾倒，评分为3分。
4// 病理组织学分析
沿脑桥上界面切断，去除嗅球，称全脑重，立即放入-20℃冰箱， 20 min 后取出，由前向后做连续冠状切片（切片厚度2 mm）。将脑切片置入0.1% TTC溶液中，后放入恒温振荡器中，37℃避光染色30 min，将脑切片取出后放入4% 中性甲全溶液中固定 24 h，取出脑片，相机拍照，用 Motic Images Plus 显微图像分析系统计算脑梗死面积和梗死体积。
模型应用
MACO模型主要应用于脑卒中疾病以及相关药物等研究。
声明
本文涉及的动物建模操作经实验动物福利伦理委员会（IACUC）审批和通过。
参考文献
1. 张添源，徐安定，逯丹. 小鼠脑梗死模型中全脑成像技术应用展望. 海南医学. 2020, 31(15): 2017-2019.
2. 韩冰，范海健，朱斌，秦国初等. 小鼠缺血性脑梗死模型的制作及7T MR 成像的实验研究. 医学影像学杂志. 2012, 22(10): 1755-1757.
公司简介
深圳市拓普生物科技有限公司（后简称拓普生物）成立于2015年2月，是一家集生命科学基础研究、医学成果市场转化和生物医药研发外包服务为一体的国家高新技术企业。拓普生物以临床前动物实验技术为核心，建立了一个以实验动物和动物模型为主的服务&产品供应链体系，为基础科研、医学转化、新药研发等生物技术领域提供一站式专业服务。
拓普生物目前在深圳建立三个动物科研服务基地：南山大学城（1600m²）、坪山生物医药研发转化中心（1300m²）和光明恒泰裕大厦（1128m²）。同时，拓普生物亦积极在广州、珠海和东莞布局，2022年将建成粤港澳大湾区一体化动物科研服务平台，填补粤港澳大湾区生物医药产业配套服务的市场缺口。
拓普生物具有强大的实验动物专家团队和专业的技术服务团队，已经为国内外300多家医院、高校和生物医药公司提供了1000多项技术服务！拓普生物将继续秉承“匠心服务”的理念，真诚地迎接每一个需求客户，助力生物医药领域早日实现“愿天下没有难治的疾病”美好愿景！
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文献和实验本人现在正在做线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验（MCAO模型），这方面的资料我查了一些，这个实验我也作了一段时间，不敢说很专业了，不过现在基本上我能在15min左右完成手术，而且手术过程中不出一滴血，造模后缺血程度基本一致。虽然前面有很多前辈发了很多MCAO的很专业的贴子，不过我觉得比较凌乱，现在我把我的心得体会和以前的贴子的精华部分奉献给大家，希望这会对将要做这个实验的朋友有一丝的帮助。虽然做实验总会有郁闷的时候，不过风雨之后总会见到彩虹的，这可以也是我的心得
artery occlusion 的缩写形式，中文意思为中脑动脉栓塞。大脑中动脉栓塞模型并不是把线栓插进大脑中动脉，而是经颈内动脉入颅并插入大脑前动脉，从而阻塞来自栓塞侧的大脑前动脉的血供，以及堵塞接受后交通动脉血供的的颈内动脉颅内段。 ICH造模：ICH是intracerebral hemorrhage的缩写形式，中文意思为脑出血。目前主要有四种方式用于脑出血动物模型的制备：微球囊充胀法、细菌胶原酶注入法、自体血注入法和自发性脑出血模型。 TBI造模：TBI是traumatic brain injury
ICA后进入MCA。4．大脑中动脉（MCOA）局灶性卒中模型的建立方法包括外科机械性闭塞模型、线栓法及光化学方法等。由内皮素－10.1 nmol／μl建立的土拔鼠MCA闭塞及再灌注模型，与人类的发病机制比较接近，是第一个利用生物因素制成的MCA闭塞及再灌注模型。5．插线法Koizumi于日本卒中会议(1985)首次报道了可逆性MCAO模型，解决了大鼠局灶脑缺血再灌流损伤研究的难题。分离暴露颈部血管，从ECA或CCA分叉处插入4～0尼龙线，进入ICA，阻断MCA起始端及其所有侧支血液供应，导致MCA
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