- ￥420
- 普利莱
- E1030-9
- 北京
- 2025年11月24日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Nitric Oxide Assay Kit
- 保质期：
6个月
- 供应商：
普利莱APPLYGEN
- 保存条件：
4°C保存
- 规格：
500次
适应物种：人、猴、猪 、牛 、羊 、鸡 、兔 、小鼠 、大鼠
| 货号 | 产品名称 | 规格 | 价格（元） |
| E1030 | NO检测试剂盒（NitricOxideAssayKit） | 500次 | 420 |
适应物种：人、猴、猪 、牛 、羊 、鸡 、兔 、小鼠 、大鼠
描述： (Nitric oxide，NO)是一种重要的气体信号分子和效应分子，可以作为第二信使参与许多生物效应和生理病理过程。体内NO含量低，半衰期短，且易被氧化。Griess反应一直是最经典的生物样品NO测定方法，反应产物的光密度OD值与NO浓度呈线性关系。本试剂盒基于Griess 反应原理，采用优化的反应条件和比色法测量液体样品NO的浓度。方法简单，线性范围2.5~800µM。按照每150 µl反应体系含50 µl样品推算，相当于样品的检测灵敏度约为300 pmol/50 µl。
特点：
1、 试剂盒基于最经典的Griess反应原理。操作方法简单方便，灵敏度高。
2、 线性范围2.5-800uM。
3、 适用于血液、尿、培养基中的检测。
4、 发表的SCI文章超过50篇
规格：500次
储存：4ºC避光保存6个月有效
准备步骤：
测定前取出试剂升温到室温。
标准品稀释：每次测量均新做标准曲线，用与样品相似的液体稀释标准品。
A. 取100 mmol/L NaNO2标准品8µl，加到992µl蒸馏水中，得到1000µl之800 µM管。
B. 从800 µM管取200µl加入200µl蒸馏水得400µM管，然后依次取样用蒸馏水倍比稀释，得到200、100、50、25、12.5、6.25、3.13、1.57 μM管。最后设置不加标准品的0浓度管。
C. 从以上各管各取50 µl 加入酶标板。
D. 等待后续加入样品，以及加入Griess试剂后，一起反应并测量。
样品测量：
1. 取50 µl标准品或样品，加入96孔板中。
2. 每孔加入50 µl Griess R1
优化步骤：室温避光放置5分钟。此步骤可进一步提高灵敏度。但NO浓度较高时可省略。
3. 每孔加入50 µl Griess R2。
4. 室温避光放置5分钟。
5. 540 nm (490-550 nm均可)测定吸光度。应在30 min内测完，以免退色降低灵敏度。
6. 制备标准曲线：以吸光度OD值为x轴，标准品浓度为y轴，用Excel做图并得到标准曲线公式。
7. 将样品OD值代入公式计算NO浓度。
说明：
1. 在30 min内测完，以免退色而降低灵敏度。
2. 快速测定：如果样品NO浓度较高，则可将Griess R1和R2预先1:1等体积混合后，各取100 µl混合试剂与50 µl样品反应测定。
3. 样品所赖以存在的液体的内在成分会干扰测定，降低OD值和灵敏度。干扰程度：尿液>血清>血浆>培养基>蒸馏水。
4. 每次测量必须新做标准曲线，尽量用与样品相同的液体稀释标准品。
5. 细胞培养基中酚红的红色颜色不影响测定。
以下为使用普利莱NO检测试剂盒发表的文章，供参考：
1、Ji Y, Sun X, Liu X Y, et al. Toxoplasma gondii: effects of exogenous nitric oxide on egress of tachyzoites from infected macrophages[J]. Experimental parasitology, 2013, 133(1): 70-74.
2、Hong Q, Qi K, Feng Z, et al. Hyperuricemia induces endothelial dysfunction via mitochondrial Na+/Ca 2+ exchanger-mediated mitochondrial calcium overload[J]. Cell calcium, 2012, 51(5): 402-410.
3、Ding Y, Zhang Z F, Dai X Q, et al. Myricetin protects against cytokine-induced cell death in RIN-m5f β cells[J]. Journal of medicinal food, 2012, 15(8): 733-740.
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文献和实验一、反应曲线 首先，我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图，可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，如下图所示： 二、反应原理 对于延迟区来讲，无规律可寻，对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法，是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时，连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点，并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等，此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
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