SYBR Green I是一种DNA双链特异性染料。在DNA合成的每个阶段,包含在反应液中的SYBR Green I染料可与扩增的PCR产物相结合;扩增子可通过其荧光而被检测到。 热启动的实验方法已被证明可显著改善特异性、灵敏度及PCR的产量。在FastStart Taq DNA聚合酶的某些氨基酸残基上的热不稳定性封闭基团使得修改后的酶在室温(+15至+25°C)没有活性。因此,在引物可以非特异性结合的阶段并没有发生延伸。FastStart Taq DNA聚合酶可在高温(如在+95°C的预孵育步骤)下通过将封闭基团去除而被激活。