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10000
- 英文名:
Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Chlamydiales order
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海炎熙生物科技有限公司
- 保存条件:
-20度避光
- 规格:
20次反应/50次反应/100次反应
| 规格: | 20次反应 | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50次反应 | 产品价格: | ¥1300.0 |
| 规格: | 100次反应 | 产品价格: | ¥2300.0 |
探针法衣原体目通用实时定量PCR试剂盒
Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Chlamydiales order
储存:-20度,避光保存,保质期一年。避免反复冻融。
货号:Cqt-ord-20 包装:20个反应
货号:Cqt-ord-50 包装:50个反应
货号:Cqt-ord-100 包装:100个反应
试剂盒特点:
1, 特异性检测衣原体目微生物,包括衣原体、副衣原体、西门坎氏菌和石德菌等,与衣原体目以外的其他生物基因组无交叉反应。
2, 灵敏度高,最低检测极限低于20个基因组/反应。
3, DNA聚合酶采用热启动方式,可抑制非特异性扩增,降低背景荧光。
4, 带有阳性对照样品,可用于检验试剂盒有效性。
5, 带有UDG酶和dUTP,可降低残留DNA的污染。
衣原体目(Chlamydiales order) 是一类专性细胞内寄生的革兰氏阴性细菌,其生物学特征独特且高度适应寄生生活,革兰氏染色阴性,典型形态为球形或椭圆形,直径约0.2–1.5 μm;代表性种属有衣原体属(Chlamydia)、嗜衣原体属(Chlamydophila)、副衣原体属(Parachlamydia)等;基因组大小约1.0–1.2 Mb,基因数量约900–1,000个;细胞壁含肽聚糖和外膜蛋白,但缺乏典型的革兰氏阴性菌脂多糖,仅含脂寡糖,无鞭毛,无荚膜,但可通过宿主细胞膜形成包涵体;具有独特的双相发育周期,依赖宿主细胞完成增殖,严格细胞内寄生,无法在无生命培养基中生长。衣原体主要定殖于宿主黏膜上皮细胞(如眼部、呼吸道、泌尿生殖道),可在环境中短暂存活(如干燥表面),但感染需宿主细胞参与。
衣原体目(Chlamydiales)的检测方法多样,有培养法、PCR法、血清学检测方法、抗原检测方法和宏基因组测序法等,不同方法在灵敏度、特异性、操作复杂性和成本等方面各有优劣。PCR法在灵敏度和特异性方面优势明显,一般作为优选方法。
探针法衣原体目通用实时定量PCR试剂盒针对16S rRNA基因设计特异性引物和探针,可以特异性识别衣原体目的各种微生物,经BLAST验证,与衣原体目以外的其他生物基因组没有交叉反应,适用于对衣原体目微生物的检测。
本产品仅供研究使用。
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文献和实验-A尾巴的RNA分子加上一串A尾巴,然后用带有一段通用序列(universal tag)的Oligo-dT及RT酶来合成cDNA。这样设计的一个好处就是一次RT反应合成了所有miRNA分子以及其他小RNA、mRNA对应的cDNA,接下来想用来检测什么都可以,细细算来省了不少特异引物和多次RT反应的钱呢!整个RT反应操作也是非常简单,加入预先混好的酶,37℃孵育60min,95℃孵育5min即完成cDNA合成。 最后一步就是取出一点cDNA为扩增模板,加入正反引物和real-time PCR 试剂盒
也大叹“Very expensive, especially for small projects”。 咱们做实验的,对试剂的要求自然是1.质量可靠 + 2.价格相宜,前者保证实验早出结果,出好结果,不要太多折磨,后者则是要老板承受得起,毕竟没有病人替我们买单。因此自行设计定制标记探针就是多数“第三世界”实验室的选择。Taqman探针法的第二大类产品就是不带探针引物的通用探针法定量检测试剂盒——有酶、Buffer、内参等等配套试剂,模版引物探针自备。大家关心的问题不外是:1.哪一家探针合成标记
所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程











