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YAC-1细胞货号:CC-Y2
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无
YAC-1
1x10^6/瓶/支
北京博沃尔斯生物科技有限公司
详询
小鼠淋巴瘤细胞
哺乳动物
贴壁/悬浮
是
顺丰快递
5年
生长良好
YAC-1细胞培养/YAC-1细胞株复苏/YAC-1细胞系传代/YAC-1细胞冻存/YAC-1小鼠淋巴瘤细胞*发表【中文论文】请标注:由北京博沃尔斯生物科技有限公司提供;*发表【英文论文】请标注:From Beijing Bovols Biological Technology Co., Ltd.
培养操作说明 复苏: 1. 从液氮中取出细胞冻存管,快速将其置入 37℃水浴中解冻直至冻存管中无结晶,75%的酒精擦拭冻存管外壁; 2. 将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min; 3. 弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2培养瓶,于 37℃,5%CO2 细胞培养箱中培养;传代:(1)贴壁细胞: 1. 细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次; 2. 添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min; 3. 弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,按1:2 比例进行分瓶传代,补加培养基后放入 37℃,5%CO2 细胞培养箱中培养; (2)悬浮细胞: 待细胞达到1x10^6/ml左右可按照以下方法换液培养或传代。 方法①:收集细胞,1000rpm 离心 5min,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀,将细胞悬液按 1:2 到 1:3的比例分到含培养基的新瓶中。 方法②:竖立放置培养瓶,细胞沉淀后弃去上半量培养基,将细胞悬液按 1:2 到 1:3 的比例分到含培养基的新瓶中。 冻存: 1. 离心收集细胞并进行计数(参考离心条件:1000rpm,5 min)。彻底移去离心管中的上清液; 3. 加入适量的无血清细胞冻存液(EK-Bioscience 货号:S002)于离心管中,调整细胞浓度至1~5×106 cells/mL。轻柔混匀,制成细胞冻存悬液; 4. 将离心管中的细胞冻存悬液分装于已标示完全的冻存管中; 5. 直接将含细胞悬液的冻存管放入-80℃冰箱,长期冷冻保存或转入液氮。 细胞收到处理方法 T25 培养瓶 收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好,如有破损漏液等问题,请即时联系。正常请进行以下操作: 1. 75%酒精棉球擦拭 T25 细胞培养瓶外部。 2. 将细胞放入 37 度培养箱中预温 3-4 小时后再做处理,以稳定细胞状态。 3. 显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40×,100×,200×各一张)前三天照片为重要售后依据,不提供或未拍照默认收到 状态良好。
②悬浮细胞:将瓶内所有培养基离心收集,重悬计数根据密度进行分瓶,密度在 3-5x10^5/ml 为宜。 15ml 离心管 75%酒精棉球擦拭 15ml 离心管外部去封口膜,将15ml 细胞悬液均匀接种到 2 个 T25 规格培养瓶,第二天观察细胞状态,根据密度进行换液或分瓶。2ml 冻存管 收到细胞后,检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:将细胞取出转移至液氮或-80度冰箱保存,建议尽早复苏。复苏第一管如有活性状态问题及时与我们联系,会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。
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195 人阅读发布时间:2021-12-16 12:03
187 人阅读发布时间:2021-12-16 12:05
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