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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
人脾外周血单个核细胞
- 细胞类型:
人脾外周血单个核细胞
- 肿瘤类型:
/
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
100
- 英文名:
Human Spleen Peripheral blood Mononuclear Cells
- 生长状态:
少量贴壁生长,大部分悬浮生长
- 年限:
永久
- 运输方式:
快递形式
- 器官来源:
人脾外周血单个核细胞
- 是否是肿瘤细胞:
/
- 细胞形态:
正常
- 免疫类型:
/
- 物种来源:
人脾外周血单个核细胞
- 相关疾病:
/
- 组织来源:
人脾外周血单个核细胞
- 规格:
5*10^5
脾是重要的淋巴器官,有造血、滤血、清除衰老血细胞及参与免疫反应等功能。也是淋巴细胞迁移和接受抗原刺激后发生免疫应到、产生免疫效应分子的重要场所。
脾脏作为机体最大的免疫器官,占全身淋巴组织总量的25%,含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞,是机体细胞免疫和体液免疫的中心,通过多种机制发挥抗肿瘤作用. 脾脏切除导致细胞免疫和体液免疫功能的紊乱,影响肿瘤的发生和发展。
细胞英文名称:Human Spleen Peripheral blood Mononuclear Cells
形态特性:混合体系
生长特性:少量贴壁生长,大部分悬浮生长
细胞特性
1) 细胞来源于人正常脾脏组织。
2) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
3) 细胞生长方式:细胞是混合体系,少量贴壁生长,大部分悬浮生长。



1、 细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃, 5%CO2 细胞
培养箱中培养;
2、 细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS: DMSO=9 : 1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃, 5%CO2 细胞培养箱中培养


人脾外周血单个核细胞收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,悬浮细胞需离心处理,加入6ml新鲜完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤说明书。
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文献和实验佚名 脾为人体最大的周围淋巴器官,位于血液循环的通路上,有滤过血液和对侵入血内的抗原起免疫应答等功能。 1.脾的结构 脾内也含有大量淋巴组织,但其淋巴组织的分布规律与淋巴结不同。脾无皮质髓质之分,而分为白髓、边缘区和红髓三部分;脾内无淋巴窦,但有大量的血窦(图9-18) 图9-18 脾 (1)被膜与小梁:脾的被膜较厚,表面覆
体内最大的淋巴器官。位于血循环通路上,有大量血窦,又是血循环系统的一部分。脾位于左季肋区深部,胃底与膈之间,其长轴与 10肋一致。呈卵圆形,暗红色,质软而脆,打击易破。成人脾重 100~ 200克。膈面隆凸,脏面凹陷,中央称脾门,是神经、血管出入之处。脾是腹膜内位器官。脾的被膜较厚,被膜伸入脾实质形成脾小梁,互相连接构成脾的支架。被膜和小梁里含有平滑肌纤维。脾的实质称脾髓,由淋巴组织和脾窦构成,可分白髓和红髓。白髓主要由密集淋巴组织构成,呈球状的称脾小结,是白髓的主要结构
1.Add 750μl Reagent B (50mM Tris [pH8],10mM EDTA,100mM NaCl,1% [w/v] SDS)and 50μl 100mg/ml proteinase K to each spleen. 2.Incubate overnight at 56ºC. 3.Gently shake to dissociate tissue. 4.transfer 200μl to eppendorf tube. 5.Add 50μl 5M sodium










