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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体名:
驴抗人
- 抗体英文名:
CF543 donkey anti-human IgG(H+L), highly cross-adsorbed 20318-1mg
- 靶点:
Human IgG
- 浓度:
2 mg/mL
- 应用范围:
Flow cytometry, IHC, IF (cells or tissue sections), Western blot
- 宿主:
Donkey
- 保质期:
6个月
- 目录编号:
20318-1mg
- 库存:
99
- 供应商:
Biotium
- 标记物:
CF543
- 克隆性:
多克隆
- 保存条件:
-20°C
- 形态:
Liquid: PBS/50% glycerol/2 mg/mL BSA/0.05% azide, Lyophilized: PBS/15 mg/mL BSA/20 mg/mL trehalose after reconstitution
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文献和实验体系,可直接应用于所有的分子生物学下游研究,包括酶学研究、cDNA文库的构建、RT-PCR、S1核酸酶分析、核糖核酸酶保护、引物扩增、点杂交和斑点杂交、体外转录实验、差异显示和Northern杂交,亦可用于基因克隆及基因表达分析。 本试剂盒的Dynabeads Oligo(dT)25悬浮在pH7.4含有0.02%的叠氮钠作为保护剂的磷酸缓冲液中,浓度为3.3×108个磁珠 (约5mg/ml)。根据组织或细胞类型和mRNA表达水平情况,每200μl(约1mg)的Dynabeads Oligo(dT)25
制备的细胞裂解液上清去进行抗体-agarose beads孵育实验。抗体可以先加入上清中与样品孵育数小时后再加入Protein A或者G beads孵育过夜,也可以同时加入抗体和Protein A或者G beads孵育过夜。 一般选择1mg总蛋白(1mg/ml)对应添加1 ug 抗体,最高可以添加至5 ug 抗体,过多的抗体会产生假阳性。这个步骤中关键因素在于选择合适的阴性对照。一般选用加同样量的IgG,但更为妥当的方法是选择针对胞内其它无关目的蛋白的一抗做对照。 例如,做膜蛋白A的免疫
(BSA),加入微滴板中(45μl孔),4℃过夜(约15h),用洗涤液洗板3次×5min。 2)封闭 : 每孔加200μl含4.5%脱脂奶及变性鲑鱼精子DNA(1mg/ml)、0.1mmol/L EDTA的20mmol/L Tris-Hcl(pH7.5)(含150mmol/L NaCl缓冲液,37℃温育80min,洗板数次。 3)抗原抗体反应 : 用释释液1:8000稀释单克隆抗BSA抗体,每孔加50μl,室温(~22℃)下45min,洗板孔15次×10min,去除未
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