- ￥3500
- YLKBIO
- YLK-XB377
- 进口传代
- 2025年08月08日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
人肝癌细胞带绿色荧光 SMMC7721/GFP细胞系
- 细胞类型：
人肝癌细胞带绿色荧光 SMMC7721/GFP细胞系
- 肿瘤类型：
/
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 库存：
100
- 英文名：
SMMC7721/GFP
- 生长状态：
贴壁生长
- 年限：
永久
- 运输方式：
快递形式
- 器官来源：
人肝癌细胞带绿色荧光
- 是否是肿瘤细胞：
是
- 细胞形态：
正常
- 免疫类型：
/
- 物种来源：
人肝癌细胞带绿色荧光 SMMC7721/GFP细胞系
- 相关疾病：
/
- 组织来源：
人肝癌细胞带绿色荧光 SMMC7721/GFP细胞系
- 规格：
T25培养瓶
| 细胞英文名称 | SMMC7721/GFP | 细胞中文名称 | 人肝癌细胞带绿色荧光 |
| 形态特性 | 上皮细胞 | 生长特性 | 贴壁生长 |
| 培养体系 | DMEM+10%FBS | ||
| 传代方法 | 1:2传代 | 传代情况 | |
| 冻存条件 | 无血清细胞冻存液 | ||
| 备注 | 悬浮细胞离心收集 | ||
STR：
1、 细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃， 5%CO2 细胞
培养箱中培养；
2、 细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）用适量的冻存液（FBS： DMSO=9 ： 1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜， 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入 37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结
晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀用 6ml 完全培养基重悬，接种 25cm2 培养瓶，于 37℃， 5%CO2 细胞培养箱中培养
人肝癌细胞带绿色荧光 SMMC7721/GFP细胞系收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液移入废液缸中，悬浮细胞需离心处理，加入6ml新鲜完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤说明书。
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文献和实验在一起通过仪器，与单个细胞相比，测量高度不变，宽度和面积变为两倍，即出现 FSC-Height 不变，FSC-Area 和 Width 增大的现象，如图所示： 分析数据时，如果没有排除粘连体，就可能对结果的判断造成误导。举个例子： 如果样本中一部分细胞带有 GFP 绿色荧光，一部分细胞不带荧光，需要分选出带有 GFP 信号的细胞，细胞在缓冲液中的状态，可能会出现以下 5 种情况： 单细胞 粘连体 一个带 GFP 和一个不带 GFP 的细胞形成的粘连体（红框），在没有被排除的情况下，会被默
波长590 nm进行荧光读取。最佳的读取可提供最大的动态范围、最佳的线性度以及最小的标准偏差。 3.对数据进行作图。 细胞增殖检测 用MTT细胞生长检测试剂盒(CT01)检测增殖情况，用AldeRed ALDH检测试剂盒(SCR150)分析醛脱氢酶 (ALDH)表达情况。 肿瘤干细胞表达醛脱氢酶(ALDH)水平升高。AldeRed™ ALDH检测试剂盒可使用ALDH红移荧光底物基于醛脱氢酶(ALDH)表达进行活肿瘤干细胞鉴定和分离，允许同时使用包括GFP细胞系在内的绿色荧光报告物。 1.
/G1期了，与阴性CELL相比，增殖的S+G2/M期CELL明显减少！ 这种矛盾怎么解释呢? （2）难道是融合的GFP蛋白影响了目的蛋白的空间构象，从而影响了生物特性！ 同一学校有人构建了同一目的基因的载体,表达非融合蛋白(带了HIS标签,非GFP蛋白)，稳定转染了和我同样的细胞系，流式测周期,结果是与对照相比，转染的℃ELL S+G2/M的细胞明显增多！和我的结果不一样！ GFP细胞上流式最好不要用乙醇固定，gfp很容易透出胞外的，导致阳性
