土壤有效硅测试盒

土壤有效硅测试盒
微量法
注    意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：
硅元素是一种十分重要的植物营养元素，土壤中有效硅含量影响着植物的光合作用、呼吸作用以及对逆境的抗性。

测定原理：
硅酸根与钼酸铵在弱酸条件下生成硅钼酸，可被还原剂还原成硅钼蓝，在700nm有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器：
天平、常温离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、震荡仪。

试剂组成和配制：
提取液：液体105mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体4mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体4mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体4mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加入4mL试剂四溶剂充分溶解。
试剂四溶剂：液体4mL×1瓶，4℃保存。

样本处理：
新鲜土样风干，过20目筛，按照土壤质量（g）：提取液体积(mL)为1：5的比例（建议称取约0.2g土样，加入1mL提取液），振荡提取1h，10000g ，25℃离心10min，取上清液待测。

测定操作表：

	空白管	测定管
样本（μL）		40
提取液（μL）	40
试剂一（μL）	40	40
混匀，35℃，15min
试剂二（μL）	40	40
混匀，25℃，10min
试剂三（μL）	40	40
试剂四（μL）	40	40
充分混匀，25℃静置30min

土壤有效硅测试盒于微量石英比色皿/96孔板，蒸馏水调零，测定700nm处吸光值A，分别记为A空白管和A测定管，△A=A测定管-A空白管

计算公式：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.0933x -0.0523，R2 = 0.9992
有效硅含量（mg/kg）=（△A+0.0523）÷ 0.0933×V反总÷（W×V样÷V样总）= 53.6×（△A+0.0523）÷W
V反总：反应总体积，0.2mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.04mL；V样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.0467x -0.0523，R2 = 0.9992
有效硅含量（mg/kg）=（△A+0.0523）÷ 0.0467×V反总÷（W×V样÷V样总）
                     = 107.2×（△A+0.0523）÷W
V反总：反应总体积，0.2mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.04mL；V样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g