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猪瘟病毒E2蛋白(CSFV-E2)酶联免疫分析(ELISA)

试剂盒
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  • ¥800 - 1200
  • YLKBIO
  • 0.625 ng/mL - 20 ng/mL 
  • YLK-EZ0014
  • 国产
  • 2026年03月23日
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    • 供应商

      优利科(上海)生命科学有限公司

    • 库存

      100

    • 样本

      血清、血浆、组织液等液体样本

    • 标记物

      hrp辣根过氧化物酶

    • 适应物种

    • 应用

      科研

    • 检测方法

      酶联免疫法

    • 检测范围

      0.625 ng/mL - 20 ng/mL 

    • 规格

      96T/48T

    猪瘟病毒E2蛋白(CSFV-E2)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒

    本试剂仅供研究使用      

    检测范围:                                              
    0.625 ng/mL - 20 ng/mL 

    灵敏度:                                              
    最低检测浓度小于0.1 ng/mL


    目的:本试剂盒用于测定猪血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中瘟病毒E2蛋白(CSFV-E2)的含量。

    实验原理:
    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪瘟病毒E2蛋白(CSFV-E2)水平。用纯化的猪瘟病毒E2蛋白(CSFV-E2)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入猪瘟病毒E2蛋白(CSFV-E2),再与HRP标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的猪瘟病毒E2蛋白(CSFV-E2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猪瘟病毒E2蛋白(CSFV-E2)含量。

    试剂盒组成

     
    试剂盒组成 96孔配置 保存
    说明书 1  
    封板膜 2  
    密封袋 1  
    酶标包被板 1×96 2 -8℃ 保存
    标准品 0.3ml×6管 2 -8℃ 保存
    酶标试剂 10 ml×1瓶 2 -8℃ 保存
    样品稀释液 6 ml×1瓶 2 -8℃ 保存
    显色剂A液 6 ml×1瓶 2 -8℃ 保存
    显色剂B液 6 ml×1瓶 2 -8℃ 保存
    终止液 6 ml×1瓶 2 -8℃ 保存
    20×浓缩洗涤液 25ml×1瓶 2 -8℃ 保存
    注:标准品浓度依次为:20、10、5、2.5、1.25、0 ng/mL.

    样本处理及要求
    1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
    2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
    3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
    4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
    5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2
    -8℃ 的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
    6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于
    -20 保存,但应避免反复冻融.
    7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。


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    产品细节图片1产品细节图片2

    操作步骤

     
    1. 标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;。
    2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
    3. 加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。
    4. 温育:用封板膜封板后置 37℃ 温育60分钟。
    5. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
    6. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
    7. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀, 37℃ 避光显色15分钟.
    8. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
    9. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
    产品细节图片3

    猪瘟病毒E2蛋白(CSFV-E2)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒注意事项:
     
    1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
    2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
    3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
    4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
    5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
    6. 底物请避光保存。
    7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
    8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
    9. 本试剂不同批号组分不得混用。
    10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。



    计算:
    以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,   
    在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD     
    值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释      
    倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标      
    准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值      
    代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释      
    倍数,即为样品的实际浓度。    

                  
    产品细节图片4
                                                 

    (此图仅供参考)


    试剂盒性能:
    1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
    2.批内变异系数与批间变异系数应分别小于10%和15% 。


    猪瘟病毒E2蛋白(CSFV-E2)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒保存条件及有效期:
    1.试剂盒保存: 2
    -8℃
    2.有效期: 6个月

     

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    图标技术资料

    资料下载:

    样本处理方法.doc 附 (下载 0 次)

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