(R)-3,3'-双(1-萘基)-1,1'-联萘基-2,2'

植物质膜蛋白的提取和溶解

] 。 越来越多的数据显示，膜蛋白的功能和亚细胞定位是受翻译后修饰调控的。双向凝胶电泳构建了一个通用的能够分离修饰后蛋白质的方法。因此，由于等电点 pI 或是表观分子质量的不同，糖基化、酰基化或脱酰基化后的蛋白质点会成列出现 [ 14，15 ]；磷酸化和 α-乙酰化分别把蛋白质的 pI 转向酸性 pH 和碱性 pH，但不改变表观分子质量。更为普遍的是，任何带电残基的共价修饰，都会修改蛋白质的净电荷，反过来使蛋白的 pI 发生变化。由于它们的高疏水性，造成了双向凝胶电泳分析整合蛋白质的局限性，需要使用特殊

完整蛋白质从 SDS-PAGE 胶中的电洗脱及其 MALDI-TOF MS 分析

) 为标准 样品，发现这种方法比被动洗脱的效果好。当凝胶上样量为5jug 时，回收效率分别为： BSA   8 9 % 和 PhosB 5 8 % ^ 被 动 洗 脱 （ 将捻碎的蛋白质条带浸泡在I X 电泳缓冲液过夜） 无法回收到磷酸酶B ，并且只能回收加样的 B S A 的 39 %   ( 表 27-1)。在 进 行 MALDITOF  M S 之前，将浓缩蛋白质与基质共结晶，进一步去除残留杂质。混合蛋白质溶液 和基质溶液[芥子酸，l 〇 mg/m L 溶于乙腈/水 （3  :  7)]，置

原位杂交组织化学与免疫细胞化学结合法

天。 　　（27）D196 显影液，20 ℃显影5～10min。 　　（28）自来水冲洗数秒。 　　（29）F5 坚膜定影液10min。 　　（30）自来水冲洗15min。 　　（31）切片温箱烤干，脱水，透明，封片。 　　结果：蛋白或多肽免疫反应阳性细胞为棕色胞质，而其相应mRNA为黑色银颗粒聚集。 　　二、非同位素原位杂交组化与免疫组化联合法 　　非同位素标记物很多例如：生物素（biotin），地高辛（Digoxigenin），汞